Ralentissement de la clairance de la charge virale et des complexes immunitaires contenant le virus chez les patients atteints de fièvre hémorragique dengue

Contexte Bien que des études antérieures ont révélé la contribution d’un haut niveau de réplication du virus de la dengue aux maladies graves et potentiellement mortelles dengue hémorragique fièvre DHF et syndrome de choc de la dengue, l’implication du virus de la dengue dans les processus immunopathologiques pendant la transition de la fièvre à La défervescence, qui est une étape critique dans la détermination de la progression de la DHF, n’a pas été appréciée Précédemment, nous avons signalé que le virus de la dengue pouvait être détecté dans les complexes immunitaires des patients atteints de dengue hémorragique. Les patients avaient une infection secondaire confirmée par le virus de la dengue d’une épidémie importante dans le sud de Taïwan. Les patients atteints de dengue avaient une infection virale significativement plus élevée que les patients atteints de dengue. charge et un taux de clairance plus lent que les patients wi la fièvre dengue pour les charges virales & gt; log des copies d’ARN / mL le jour de la défervescence, les valeurs prédictives positives et négatives de DHF sont et, respectivement, un déclin plus élevé et plus lent des immuncomplexes contenant le virus de la dengue et une augmentation subséquente du Ca et du récepteur soluble de l’interleukine abcès. Comparaison avec les patients souffrant de dengueConclusions Ces résultats indiquent que des taux plus faibles d’élimination de la charge virale et des immuncomplexes contenant des virus sont associés à une activation immunitaire ultérieure et contribuent à la progression de la DHF à ce stade critique. jour de défervescence peut prédire les cas de DH

Les sérotypes des sérotypes du virus de la dengue de la dengue [DEN] – provoquent la maladie arbovirale la plus importante dans les zones tropicales et subtropicales Il a été estimé que & gt; millions d’infections par le virus de la dengue se produisent chaque année dans le monde entier Les présentations cliniques vont de la fièvre dengue asymptomatique à une maladie relativement bénigne, aux maladies graves et potentiellement mortelles, la dengue hémorragique et le syndrome de choc de la dengue [DSS] [ -] La pathogenèse de la DHF et du DSS a été l’un des problèmes majeurs de la recherche sur le virus de la dengue. En plus des facteurs de risque signalés pour la DHF et la DSS, des facteurs majeurs ont été identifiés. Basé sur l’observation que les individus ayant une infection secondaire présentaient un risque plus élevé de développer la DHF et / ou le DSS, l’hypothèse immunitaire indique que les anticorps non réactifs croisés provenant d’une infection antérieure peuvent renforcer l’infection par le virus de la dengue. amélioration dépendante in vitro et confirmée par plusieurs études de cohorte Parce que différentes souches virales de la dengue ont été signalées comme liées à des flambées de En cas de maladie sévère , l’hypothèse virale soutient que la dengue sévère est le résultat d’une infection par une souche plus virulente Les deux hypothèses prédisent une plus grande ampleur de la réplication virale chez les patients atteints d’une maladie plus grave. Cliniquement, une étape critique dans la détermination de l’évolution vers la DH et / ou le DSS est le passage de la fièvre à la défervescence, au cours de laquelle sévère la corrélation entre la charge virale maximale et la sévérité de la maladie. hémorragie, fuite plasmatique et / ou défaillance circulatoire. Des études de réponses immunitaires ont rapporté des complexes immuns circulants et une activation du complément chez des patients avec DHF et / ou DSS durant cette période En outre, plusieurs cytokines et récepteurs de cytokines, tels que TNF- α, IL-, IFN-γ, IL-, IL-β, IL-, IL-, le récepteur IL-soluble sIL-R et le récepteur soluble du TNF II sTNFR-II, ont été rapportés comme étant élevés chez les patients esprit h DHF et / ou DSS [, -] Cependant, l’implication du virus dans les processus immunopathologiques à ce stade critique reste inconnue Précédemment, nous avons signalé que le virus de la dengue peut être détecté dans les complexes immuns de patients atteints de DHF pendant la défervescence. l’étude actuelle, nous avons examiné la charge virale, le virus dans les complexes immuns, les réponses d’anticorps, les compléments et les cytokines chez les patients avec DF et les patients avec DHF pendant cette période. Les patients étaient de l’épidémie de DEN-infection à Kaohsiung, Taiwan. était la plus grande épidémie à Taiwan depuis la Seconde Guerre mondiale

Patients et méthodes

Participants à l’étude De juin à décembre, lors d’une épidémie de DEN-infection à Kaohsiung, une métropole du sud de Taiwan, les patients adultes admis à l’hôpital général de Yuan ou à l’hôpital Huei-Te recevaient un diagnostic de DF et de DHF dans l’étude La gravité de la maladie a été classée par le système de notation de l’Organisation mondiale de la santé Aucun des participants n’appartient à la catégorie intermédiaire précédemment décrite Le jour de la maladie a été défini comme le jour d’apparition de la fièvre. ° C Le jour de la fièvre a été défini comme le jour de la température orale de défervescence, & lt; C, et les jours avant et après ce moment ont été désignés consécutivement Avec le consentement éclairé, des échantillons de sang séquentiels ont été recueillis. Tous les patients ont été confirmés avoir une infection due à DEN- par un test RT-PCR niché Une enveloppe / IgM / IgG membranaire a été réalisée en utilisant des échantillons de sérum de convalescence pour déterminer Le virus répondait à la définition de l’infection primaire ou secondaire Un virus de l’encéphalite japonaise IgM protéine non structurelle a été utilisé pour exclure l’infection par le virus de l’encéphalite japonaise Dengue ARN viral dans le plasma et dans les complexes immuns. test d’immunoprécipitation modifiée et quantifié par RT-PCR en temps réel avec la sensibilité des copies d’ARN par ml de plasma Durée et taux de clairance de la charge virale La durée de la charge virale détectable a été estimée en supposant que la période l’ARN viral a été détecté le jour précédant le début de la maladie et s’est terminé le dernier jour où l’ARN viral a été détecté Le taux d’élimination de la charge virale a été déterminé en calculant la pente de la charge virale. Les anticorps IgM et IgG anti-lengue IgM et IgG anti-lengue ont été détectés en utilisant un ELISA Dengue Duo à capture d’IgM / IgG commerciale; PanBio avec les niveaux déterminés comme le pourcentage de réactivité des échantillons témoins positifs Des dilutions en série de l’échantillon de contrôle positif IgM – dilutions jusqu’à pli et de l’échantillon de contrôle IgG positif, – à des dilutions ont été soumises aux tests ELISA IgM et IgG, respectivement, pour obtenir une courbe linéaire entre l’absorbance nm et les dilutions. Des échantillons de sérum dilué – dilutions de l’IgM et dilutions de l’IgG ont été soumis simultanément aux IgM et aux IgG ELISA avec des échantillons témoins positifs et des échantillons de coupure. Les scores IgM et IgG ELISA des échantillons positifs étaient le pourcentage d’absorbance comparé à celui de la dilution de l’échantillon témoin positif IgM et celui de l’IgG positif dilution de l’échantillon de contrôle, respectivement Le même lot d’échantillons de contrôle positif et d’échantillons de coupure fournis par le fabricant a été utilisé pour tous les échantillons testés. Western blot anal ysis Des lysats de cellules C infectées par la souche C et D infectées par la souche DEN-Nouvelle-Guinée ont été soumises à électrophorèse sur un gel SDS-% polyacrylamide. Après transfert et blocage, la membrane de nitrocellulose a été découpée en bandes et incubée avec une dilution sérique suivie de peroxydase. Les signaux ont été détectés par le réactif de chimiluminescence PerkinElmer LifesciencesELISA IFN-γ, IL-, et sIL-R dans le plasma ont été déterminées par des kits ELISA de Pierce Endogen, sTNFR-II a été déterminée par un kit de systèmes R & D et Ca et Ca ont été déterminés par des kits de BD Biosciences Les limites supérieures des valeurs normales pour IFN-y, IL-, sIL-R et sTNFR-II sont pg / ml, pg / ml, U / ml et pg / mL, respectivementAnalyse statistique Le test U de Mann-Whitney a été utilisé pour comparer les paramètres entre les groupes pour toutes les variables sauf le sexe, qui a été comparé à l’aide du test exact de Fisher.

Résultats

Caractéristiques des patients Parmi les participants à l’étude, la définition de l’infection primaire répondait à la définition de l’infection secondaire car l’infection primaire est considérée comme ayant un mécanisme pathogène différent de l’infection secondaire et parce que le nombre de cas était faible Comme indiqué dans le tableau, il n’y avait pas de différences statistiquement significatives dans le sexe P =, selon le test exact de Fisher, l’âge ou le jour de l’entrée P = et P = , respectivement, par Mann-Whitney U test entre les groupes DF et DHF Bien qu’il n’y avait pas de différence statistiquement significative entre les groupes de leucocytes et de plaquettes, les numérations plaquettaires nadir étaient plus faibles dans le groupe DHF que dans le groupe DF P & lt; , par le test U de Mann-Whitney De plus, les taux d’aspartate aminotransférase et d’alanine aminotransférase à l’entrée étaient plus élevés dans le groupe DHF que dans le groupe DF P = et P =, respectivement, par Test de Mann-Whitney U Ces résultats étaient généralement en accord avec ceux rapportés pour les cas pédiatriques

Caractéristiques de patients présentant une infection par sérotype de virus de la dengue secondaireCaractéristique des patients atteints de sérotype secondaire de virus de la dengueCharge des virus de la dengue supérieure chez les patients atteints de DHF que chez les patients DF pendant la transition fièvre-à-défervescence. et la sévérité de la maladie, les niveaux d’ARN viral de la dengue dans le plasma des groupes ont été comparés pour chaque jour du jour fiévreux au jour férié [figure] Le jour de la fièvre – et -, les taux d’ARN viral dengue dans les échantillons plasmatiques des patients supérieure à celle observée dans les échantillons de plasma des patients DF = P et P = respectivement par le test U de Mann-Whitney. Une tendance similaire a été observée pendant la défervescence. Les patients avec DHF présentaient des taux d’ARN viral plus élevés que les patients DF. , et P & lt ;, P & lt ;, P =, et P =, respectivement, par le test U de Mann-Whitney

Figure View largeTélécharger diapositiveLa charge virale dengue dengue chez les patients présentant une infection virale secondaire au virus de la dengue lors du passage de la fièvre à la défervescence Les taux d’ARN viral dengue dans le plasma des patients atteints de dengue DF et de dengue hémorragique ont été déterminés comme décrit dans Patients and Methods Le point de fièvre est le premier jour de la défervescence. La ligne en pointillés indique la limite de détection du test, par exemple, les copies d’ARN par ml de plasma. Les taux de dengue virale ARN dans le plasma des patients atteints de dengue DF et les patients atteints de dengue hémorragique ont été déterminés comme décrit dans Patients and Methods Fever jour est le premier jour de la défervescence. La ligne pointillée indique la limite de détection du test. , Les copies d’ARN par ml de plasma Les barres d’erreur indiquent SEViru Les complexes immuns contenant du s persistent à la défervescence chez les patients atteints de DHF Pour approfondir l’étude du virus de la dengue dans les immuncomplexes durant cette période, nous nous sommes concentrés sur les patients avec DF et les patients avec DHF examinés avec des échantillons plasmatiques séquentiels. les cas de DF et les cas de DHF sont montrés dans la figure. En accord avec les données cumulatives de la figure, la charge virale a chuté à un niveau inférieur au log des copies d’ARN / mL le jour de fièvre pour les patients avec DF et est restée & gt; log des copies d’ARN / mL chez les patients atteints de DHF Il est intéressant de noter que les complexes immunitaires contenant le virus de la dengue ont été retrouvés chez les patients atteints de DF et les patients atteints de DHF pendant la période tardive de la fièvre. resté élevé chez les patients avec DHF

Figure Vue largeDownload slideRelations entre la charge virale plasmatique de la dengue, le virus dans les immuncomplexes et les réponses anticorps antidengues durant la transition de la fièvre à la défervescence chez les patients représentatifs atteints de dengue DF A, C et les patients atteints de dengue hémorragique infection par le virus de la dengue Les taux d’ARN viral de la dengue dans les cercles ouverts du plasma et dans les carrés ouverts des immunomodulateurs et les taux des anticorps IgG fermés et des anticorps IgM fermés ont été déterminés comme décrit dans Patients et méthodes Les lignes pointillées indiquent la limite de détection. les copies d’ARN du test par ml de plasma et du score ELISA% Les barres hachurées indiquent la période fébrile Le jour férié est le premier jour de la défervescence L’analyse Western blot est décrite dans Patients and Methods, avec le jour fiévreux au dessus de chaque voie et le marqueur de poids montré à gauche Pour plus de simplicité, les scores ELISA IgG & gt;% ont été présentés en% E, enve lope; Relation entre la charge virale plasmatique de la dengue, le virus dans les immuncomplexes et les réponses anticorps antidengues lors du passage de la fièvre à la défervescence chez des patients représentatifs atteints de dengue DF A, C et de fièvre dengue hémorragique DHF B, Les taux d’ARN viral de la dengue dans les cercles ouverts du plasma et dans les carrés ouverts des complexes immuns et les niveaux de triangles fermés d’IgG antidengue et d’anticorps IgM fermés ont été déterminés comme décrit dans Patients et méthodes. Les lignes pointillées indiquent limite de détection du test copies d’ARN par ml de plasma et du score ELISA% barres hachurées indiquent la période fébrile Fièvre jour est le premier jour de défervescence L’analyse Western blot est décrite dans Patients and Methods, avec le jour de fièvre indiqué ci-dessus piste et le marqueur de poids moléculaire montré sur la gauche Pour plus de simplicité, les scores ELISA IgG & gt;% w sont présentés en% E, enveloppe; NS, protéine non structurale Réponses des anticorps En accord avec le rapport que les réponses d’anticorps IgG prédominaient en cas d’infection secondaire, les IgG antidengues augmentaient plus rapidement et à un niveau plus élevé que les IgM antidengue dans la plupart des cas. la trousse ELISA contenait un mélange de virus de la dengue comme antigène, nous avons utilisé des lysats provenant de cellules infectées par le virus DEN dans une analyse par transfert de Western pour examiner la réponse anti-DEN-anticorps Comme le montre la figure, des bandes détectables d’anticorps anti-enveloppe la réponse majeure en anticorps , corrélée avec les scores ELISA IgG de ⩾%, indiquant que les scores ELISA IgG de% représentent des niveaux significatifs de réponse anticorps anti-DEN-enveloppe De noter, l’absence d’anticorps anti-protéine non structurale observée chez les patients DF n’a pas été vu chez d’autres patients avec DF; Les taux moyens de charge virale, de virus dans les immuncomplexes, d’IgG anti-dengue et d’anticorps IgM chez ces patients sont résumés dans les figures A et B. avec DF, les patients avec DHF avaient des niveaux plus élevés de charge virale et des complexes immuns contenant du virus P = et P =, respectivement, par table de test Mann-Whitney U Une analyse plus approfondie a révélé que la durée de la charge virale était plus longue que pour les patients ayant une DF durée moyenne, vs jours; P =, par test de Mann-Whitney U En outre, la pente de la diminution de la charge virale était plus faible chez les patients avec DHF que chez les patients DF, indiquant un taux de clairance plus faible chez les patients avec DHF moyen, – vs – log RNA copies / mL par jour; P =, par Mann-Whitney U table de test Ceci a été soutenu par une augmentation plus lente des anticorps IgG et IgM antidengue pour les patients avec DHF que pour les patients avec DF P = et P =, pour les niveaux IgG et IgM, respectivement, entre la fièvre et, par le test de Mann-Whitney U

Figure Vue largeDownload slideRelations entre les niveaux moyens de charge virale de la dengue, virus dans les immuncomplexes, anticorps antidengue, Ca, Ca, cytokines et récepteurs de cytokines durant le passage de la fièvre à la défervescence chez les patients atteints de dengue DF A, C, E et les patients atteints de dengue hémorragique BFD, B, D, F présentant un sérotype de virus de la dengue A et B présentent les taux d’ARN viral de la dengue dans les cercles ouverts du plasma et dans les carrés immuns ouverts et les anticorps IgG antidépresseurs fermés; déterminé comme décrit dans Patients et méthodes Les lignes pointillées indiquent la limite de détection de l’essai copies d’ARN par ml de plasma Les barres hachurées indiquent la période de fièvre Le jour de fièvre est le premier jour de défervescence C et D montrent les niveaux de Ca cercles fermés roses et Ca carrés fermés pourpres dans le plasma, qui ont été déterminés comme décrit dans Patients et méthodes Les lignes pointillées indiquent les limites supérieures des valeurs normales pour Ca ng / mL et Ca ng / mL E et F montrent les niveaux de ILIL récepteur soluble sIL-R; triangles fermés rouges, récepteur soluble du TNF II sTNFR-II; triangles verts ouverts, losanges fermés IL-bleus et croisements IFN-γ jaunes dans le plasma, qui ont été déterminés comme décrit dans Patients et méthodes. Les lignes pointillées indiquent la limite supérieure des valeurs normales pour IFN-γ pg / mLFigure View largeDownload slideRelationships between the taux moyen de charge virale dengue, virus dans les immuncomplexes, anticorps antidengue, Ca, Ca, cytokines et récepteurs de cytokines pendant la transition de la fièvre à la défervescence chez les patients atteints de dengue DF A, C, E et les patients atteints de dengue hémorragique DHF B, D, F qui ont été infectés par le virus de la dengue secondaire A et B montrent les niveaux d’ARN viral de la dengue dans les cercles ouverts du plasma et dans les carrés ouverts immunitaires et les anticorps IgG antidépresseurs fermés et IgM fermés, déterminés comme décrit dans Patients and Méthodes Les lignes pointillées indiquent la limite de détection du test copies d’ARN par ml de plasma Les barres hachurées indiquent la période de fièvre Le jour de la fièvre est le premier jour de déf. C et D montrent les niveaux de cercles fermés rose Ca et les carrés fermés Ca violet dans le plasma, qui ont été déterminés comme décrit dans Patients et méthodes Les lignes pointillées indiquent les limites supérieures des valeurs normales pour Ca ng / mL et Ca ng / mL E et F montrent les niveaux de ILIL récepteur soluble sIL-R; triangles fermés rouges, récepteur soluble du TNF II sTNFR-II; triangles ouverts verts, losanges fermés IL-bleus et croisements IFN-γ dans le plasma, qui ont été déterminés comme décrit dans Patients et méthodes Les lignes pointillées indiquent la limite supérieure des valeurs normales pour IFN-γ pg / mL

Tableau View largeTélécharger la diapositive Charge virale de la dengue, virus dans les complexes immuns, et durée et taux de clairance de la charge virale, compléments et cytokines pendant la transition vers la défervescence chez les patients atteints d’une infection secondaire par le virus de la dengue et la durée et le taux de clairance de la charge virale, les compléments et les cytokines pendant la transition vers la défervescence chez les patients avec infection secondaire par sérotype du virus de la dengueComplément et activation des cytokines Similaire à la diminution de la charge virale plus faible chez les patients atteints de DH que chez les patients DF, suggérant que les complexes immuns circulants étaient présents plus longtemps chez les patients avec DHF que chez les patients avec DF Figure A et B Pour approfondir les événements immunopathologiques ultérieurs, d’importants médiateurs du complément, Ca et Ca ont été examinés. Comme le montrent les figures C et D, Des concentrations de Ca et Ca ont été observées chez les patients avec DF et les patients avec DHF, avec les pics observés après diminution des immuncomplexes viraux. En outre, Ca était plus élevé chez les patients avec DHF que chez les patients avec DF P =, par Mann-Whitney U test Nous avons également examiné les cytokines et les récepteurs de cytokines qui ont été rapportés pour atteindre des niveaux plus élevés chez les patients atteints de DH que chez les patients atteints de DF, y compris sIL-R, sTNFR-II, IL-, et IFN-γ [, -] E et F, les pics de ces cytokines et récepteurs de cytokines étaient inférieurs aux pics de charge virale tant chez les patients DF que DHF, à l’exception de l’IFN-γ, qui a atteint un pic un peu plus tôt chez les patients atteints de DHF. R était plus élevé pour les patients avec DHF que pour les patients avec DF P =, par test U Mann-Whitney, alors qu’il n’y avait pas de différence dans sTNFR-II, IL-, et IFN-γ entre le tableau des groupes

Discussion

Des études antérieures sur la DHF ont porté sur la période fébrile et ont rapporté la corrélation d’un haut niveau initial de réplication du virus à la DHF Dans cette étude, nous nous sommes concentrés sur la période de transition entre la fièvre et la défervescence. une charge virale plus élevée et un taux de clairance plus faible que chez les patients atteints de DF. En outre, un niveau plus élevé et une diminution plus lente des immuncomplexes contenant des virus, ainsi qu’une élévation subséquente du Ca et du sIL-R, ont été observés chez les patients À notre connaissance, il s’agit de la première étude démontrant que les taux plus faibles d’élimination de la charge virale et des immuncomplexes viraux sont liés à une activation immunitaire ultérieure et contribuent à la DHF. Des études sur d’autres cas d’infection secondaire valideraient Ces résultats notent, l’analyse des patients atteints d’infection primaire a également révélé une charge virale plus élevée chez les patients atteints de DHF que chez les patients atteints de DF au cours de cette période données non montrées , bien qu’une analyse détaillée des complexes immuns et de l’activation subséquente n’ait pas été effectuée en raison de la petite taille de l’échantillon. Études futures impliquant un plus grand nombre de cas d’infection primaire, tels que les cas impliquant des nourrissons & lt; Les DHF et DSS sont les principales causes d’hospitalisation et de décès chez les enfants en Asie , plusieurs paramètres de laboratoire, y compris l’aspartate aminotransférase, sTNFR kD, et soluble non structurelle Comme les patients atteints de DH ont une charge virale significativement plus élevée que les patients atteints de DF entre le jour de la fièvre et le jour de la fièvre, nous avons également examiné si la charge virale pendant cette période pouvait prédire la DH; les valeurs prédictives positives et négatives sont présentées dans le tableau par rapport aux valeurs prédictives positives et négatives des autres paramètres rapportés jusqu’ici qui ont varié de [,,], les valeurs prédictives élevées positives et négatives et, respectivement pour la charge virale & gt; log Les copies d’ARN / mL le jour de la défervescence indiquent que c’est un bon prédicteur de la DHF Néanmoins, si ce prédicteur peut être utilisé cliniquement à l’avenir, il faut surveiller attentivement la défervescence et mesurer rapidement la charge virale.

Nous avons montré que le taux de clairance de la charge virale était plus faible chez les patients atteints de DH que chez les patients atteints de DF. Il est possible que cela soit une extension de la charge virale maximale, résultant d’un plus grand nombre de virus. En raison de la présence omniprésente de RNAse, l’ARN viral détecté dans le plasma provient très probablement du virion, plutôt que de la lyse des cellules infectées par le virus. Cette découverte était corroborée par une bonne corrélation entre les niveaux d’ARN viral et de les titres de virémie, déterminés par dosage en plaque en utilisant une dilution en série du plasma pour certains de nos patients données non montrées, ainsi que par cosédimentation de l’ARN viral maximal et de l’antigène nucléocapsidique après ultracentrifugation en gradient de saccharose du plasma contenant un autre virus. Alternativement, une clairance plus lente de la charge virale est liée au dysfonctionnement des lymphocytes T Des réponses de prolifération des lymphocytes T altérées à l’antigène de la dengue ont été rapportées chez des patients souffrant de dengue aiguë infection Une étude récente du répertoire des lymphocytes T a révélé une apoptose des clones de lymphocytes T spécifiques de la dengue chez les patients atteints de DH entre le jour fiévreux et le jour fébrile et a rapporté le «péché antigénique original» des lymphocytes T . Comme le moment de l’apoptose des cellules T est après le pic de la charge virale, il est concevable qu’un dysfonctionnement des cellules T spécifiques de la dengue puisse expliquer la plus faible clairance de la charge virale observée chez les patients atteints de dengue hémorragique. l’apoptose cellulaire survient plus tôt et contribue au pic de réplication virale nécessite une analyse sophistiquée des lymphocytes T au stade précoce de l’infection. La découverte d’une clairance plus lente de la charge virale chez les patients avec DH est en contraste avec les résultats d’une étude précédente. plus rapidement pour les patients avec DHF que pour les patients avec DF à la défervescence A noter, la présence de virémie dans cette étude a été déterminée par l’isolement du virus, ce qui pourrait y être interféré par la présence d’anticorps ou de complexes immuns circulants [,,] Il est probable que de plus grandes quantités de complexes immuns chez les patients présentant une DHF à la défervescence peuvent réduire l’efficacité de l’isolement du virus et, par conséquent, entraîner une baisse de la virémie. Des études récentes utilisant RT-PCR qui ont montré une charge virale plus élevée jusqu’à la défervescence chez les patients avec DHF, par rapport aux patients DF, soutiennent cette interprétation Auparavant, les complexes immuns circulants ont été rapportés chez les patients avec DHF et / ou DSS composants associés aux complexes immuns ; Dans notre étude, nous avons détecté le virus de la dengue dans les immuncomplexes directement par un test d’immunoprécipitation modifiée Ces complexes de virus et d’anticorps peuvent augmenter la réplication du virus dans les cellules mononucléaires par le biais du récepteur Fc. l’entrée – le soi-disant renforcement dépendant des anticorps in vivo – qui a été soutenu par des études impliquant des humains et des singes rhésus Alternativement, ils peuvent être impliqués dans l’élimination de la charge virale, vraisemblablement par des cellules phagocytaires dans le système réticulo-endothélial. sur le moment de la détection, c’est-à-dire peu de temps avant ou après la défervescence et l’association avec une diminution de la charge virale, les complexes immuns contenant le virus détectés étaient probablement en train d’être éliminés. plus lent pour les patients avec DHF que pour les patients avec DF figure A et B Cela conduirait à des niveaux plus élevés et une présence plus longue des complexes immuns circulants, qui conduiraient par la suite à une activation plus profonde du complément chez les patients atteints de DHF. En accord avec cette prédiction, Ca et Ca ont atteint un pic après que les immuncomplexes viraux aient diminué et un taux plus élevé de Ca, l’un des plus inflammatoires. En accord avec les rapports précédents, l’IFN-γ a atteint un pic légèrement plus tôt chez les patients présentant des taux de DH et E de DHF. En outre, sIL-R et sTNFR-II étaient élevés chez les patients avec La DHF, avec un taux de sIL-R plus élevé chez les patients avec DHF que chez les patients avec DF [,,] IL- et IFN-γ étaient également élevés chez les patients avec DHF, mais ils n’étaient pas plus élevés chez les patients avec DHF que chez les patients patients atteints de DF Cela pourrait être dû à la petite taille de l’échantillon et / ou à la variation quotidienne de l’IFN-γ Les observations selon lesquelles les taux maximaux de cytokines et de récepteurs de cytokines sont inférieurs aux pics de charge virale charges virales e plus élevé chez les patients avec DH, comparé aux patients avec DF, indique que les plus grandes amplitudes de réplication virale conduisent à une plus forte activation des lymphocytes T et une plus grande libération de cytokines chez les patients avec DHF Augmentation du taux d’activation des cellules T et des cytokines l’activation après la formation soutenue de complexes immuns, contribuerait à l’immunopathogenèse de DHF

Remerciements

Nous remercions Su-Ru Lin, Min-Huei Wu, Mei-Ying Liao, I-Jung Liu et Hsien-Ping Hu pour l’assistance technique. L’Institut National de Recherche en Santé NHRI-CN-CLP et le Conseil National des Sciences, Taiwan NSC- -B – Conflits d’intérêts potentiels Tous les auteurs: aucun conflit