Polymorphismes De Nucléotides Simples Dans ABCC2 Associée Au Dysfonctionnement Tubulaire Des Reins Induite Par Le Tenofovir Chez Les Patients Japonais Avec Une Infection Par Le VIH-1: Une Etude Pharmacogénétique

Contexte Le ténofovir est un antirétroviral largement utilisé, bien qu’il puisse causer un dysfonctionnement tubulaire rénal KTD Le but de cette étude était de déterminer l’association entre les polymorphismes des gènes codant les transporteurs de médicaments et la KTD chez des patients japonais traités par ténofovirMethods. Polymorphismes nucléotidiques simples Les SNP des gènes ABCC2, ABCC4, ABCC10, SCL22A6 et ABCB1 ont été étudiés chez 190 patients japonais KTD a été diagnostiqué par la présence d’au moins 3 anomalies dans les paramètres suivants: résorption tubulaire fractionnelle du phosphate, excrétion fractionnelle de l’acide urique , β2-microglobuline urinaire, α1-microglobuline urinaire, et N-acétyl-β-D-glucosaminidase urinaire Le génotypage a été réalisé par discrimination allélique en utilisant des dosages de TaqMan 5′-nuclease avec des protocoles standards Les associations entre génotypes et KTD ont été testées par logistique univariée et multivariée Les analyses de régression KTD ont été diagnostiquées dans 19 des 1 90 10% des patients Des analyses univariées et multivariées ont montré une association significative entre la KTD et le génotype CC à la position -24 CC ajusté odds ratio [OR], 2008; Intervalle de confiance à 95% [IC], 1711-2357; P = 017 et génotype AA à la position 1249 ajustée OR, 1621; IC à 95%, 1630-1611; P = 017 de ABCC2 analyse multivariée a montré OR plus élevé ajusté pour les patients avec les deux OR homozygotes ajusté, 3844; IC à 95%, 2051-7204; P = 015 L’haplotype ABCC2 -24T et 1249G était un haplotype protecteur pour KTD OR, 0098; IC à 95%, 002-603; P = 003Conclusions Ceci est la première étude de notre connaissance pour identifier l’association entre les SNP dans ABCC2 et KTD induite par le ténofovir dans une population asiatique Une surveillance étroite de la fonction rénale est justifiée chez les patients traités par ténofovir avec ces SNP

Le fumarate de ténofovir disoproxil Le TDF, un promédicament du ténofovir, est un inhibiteur nucléotidique de la transcriptase inverse largement utilisé pour le traitement de l’infection par le VIH-1 et de l’hépatite B du virus de l’immunodéficience humaine [1-4] Le ténofovir est excrété par sécrétion tubulaire active Bien que la néphrotoxicité du ténofovir soit considérée comme bénigne et tolérable [5-7], plusieurs cas de diabète insipide néphrogénique induit par le ténofovir, de syndrome de Fanconi et d’insuffisance rénale aiguë ont été rapportés, ainsi qu’un pronostic de la fonction rénale à long terme. l’utilisation reste inconnue [8-10] Le mécanisme de la lésion rénale induite par le ténofovir n’est pas entièrement compris. Cependant, des lésions mitochondriales dans les cellules tubulaires rénales proximales ont été observées chez les patients présentant un dysfonctionnement tubulaire rénal induit par le ténofovir KTD [11, 12]. caractéristiques et la sévérité de la KTD induite par le ténofovir varient considérablement entre les individus, le rôle de la génétique de l’hôte a attiré une attention particulière Les SNP dans les protéines transporteuses des cellules tubulaires rénales ont été étudiés pour élucider leur rôle dans la KTD induite par le ténofovir [13-15] Le ténofovir pénètre dans les cellules tubulaires rénales par la membrane basolatérale et est transporté principalement par le transporteur d’anions organiques OAT 1 et dans une moindre mesure, OAT 3, codé par les gènes SLC22A6 et SLC22A8, respectivement [16] Le ténofovir est excrété dans l’urine au niveau de la membrane apicale par 2 transporteurs sur la membrane luminale; MRP 4 et MRP 2, codées respectivement par ABV4 et ABCC2 [17, 18]. Bien que le rôle du MRP4 dans le transport du ténofovir soit bien établi, celui de MRP 2 demeure controversé [19, 18]. , 20] Récemment, MRP 7, codé par le gène ABCC10, a également été rapporté pour prendre part à l’excrétion du ténofovir [21] La P-glycoprotéine est une protéine membranaire exprimée sur les cellules du tubule proximal rénal, de l’intestin et des hépatocytes. gène, la P-glycoprotéine transporte le TDF, le promédicament des SNP du ténofovir sur ABCB1 pourrait altérer l’expression de la P-glycoprotéine et affecter ainsi l’exposition au ténofovir [22-24] Des études antérieures ont rapporté des résultats inconstants sur l’association des SNP de la protéine de transport sur KTD induite par le ténofovir [13-15] Plusieurs processus pathologiques pourraient induire la KTD, tels qu’une infection active, une inflammation, une néphropathie diabétique, l’utilisation concomitante de médicaments néphrotoxiques et une insuffisance rénale préexistante. En outre, l’interaction médicamenteuse avec d’autres antirétroviraux, en particulier les inhibiteurs de la protéase boostés par le ritonavir, modifie la clairance du ténofovir et donc la sévérité de la KTD induite par le ténofovir [26, 27]. Ainsi, l’effet des SNP sur la KTD induite par le ténofovir reste à clarifier et à isoler des autres facteurs de risque conventionnels susmentionnés pour la KTD [15, 28]. la population étudiée dans des études antérieures sur le rôle des SNP dans le KTD induit par le ténofovir était principalement blanche, et les patients d’autres antécédents génétiques ont été peu étudiés. Basée sur le contexte ci-dessus, cette étude a été conçue pour élucider l’association entre les polymorphismes les transporteurs dans les cellules tubulaires rénales et KTD induite par le ténofovir, dans un cadre conçu pour exclure d’autres facteurs isposing ou intervenant: l’inclusion de patients japonais infectés par le VIH sur la même combinaison antirétrovirale avec une charge virale VIH-1 supprimée, et sans insuffisance rénale préexistante, comorbidités majeures et infections actives

Méthodes

Déclaration d’éthique

Cette étude a été approuvée par le comité d’éthique de recherche en génétique humaine du Centre national pour la santé et la médecine mondiale, Tokyo, Japon. selon les principes exprimés dans la Déclaration d’Helsinki

Étudier le design

Nous avons réalisé une étude de cohorte monocentrique pour élucider transversalement l’association entre les SNP dans les gènes codant pour les transporteurs tubulaires rénaux chez des patients japonais infectés par le VIH et KTD induite par le ténofovir

Sujets d’étude

L’étude a inclus des patients japonais consécutifs infectés par le VIH, âgés de 17 ans et plus, avec une charge virale VIH-1 de 200 copies / ml et un traitement d’au moins 4 semaines avec du ritonavir uniquotidien 100 mg de darunavir 800 mg plus Les critères d’exclusion étaient: 1 infection active, 2 malignité, 3 diabète sucré, définis par l’utilisation d’antidiabétiques ou de glycémie à jeun. > 126 mg / dL ou glucose plasmatique> 200 mg / dl sur deux jours différents, 4 alanine aminotransférase 25 fois plus que la limite supérieure de la normale, 5 taux de filtration glomérulaire estimé eGFR calculé par l’équation de Cockcroft-Gault de <50 mL / minutes [clairance de la créatinine = [140 - âge × poids kg] / créatinine sérique × 72 × 085 pour les femmes] [29], et 6 patients sans consentement à l'étude

Des mesures

Des échantillons de sang et d’urine ponctuelle ont été prélevés le jour de l’enrôlement ou lors de la visite suivante, avec mesure du poids corporel. Les échantillons sanguins ont été utilisés pour mesurer la créatinine sérique, l’acide urique sérique, le phosphate sérique, le taux de CD4 et la protéine C-réactive. tandis que des échantillons d’urine ont été utilisés pour mesurer le phosphate, l’acide urique, la créatinine, la β2-microglobuline β2M, l’α1-microglobuline α1M et la N-acétyl-β-D-glucosaminidase NAG protozoaire. Les valeurs de β2M, α1M et NAG exprimée par rapport à la créatinine urinaire de 1 g / l / g Les concentrations de β2M et α1M ont été mesurées avec des kits d’analyse d’agrégation de latex β2M: BMG-Latex X1 “Seiken”; Denka Seiken Co, Niigata, Japon; α1M: Eiken α1M-III; Eiken Chemical Co, Tokyo, Japon, et ceux de NAG par dosage colorimétrique de l’activité enzymatique avec le 6-méthyl-2-pyridyl-N-acétyl-1-thio-β-D-glucosaminide comme substrat Nittobo Medical Co, Tokyo

Définition de la dysfonction tubulaire proximale rénale

La KTD a été définie comme la présence d’au moins 3 anomalies dans les 5 paramètres suivants: résorption tubulaire fractionnée du phosphate {1 – [phosphate urinaire × créatinine sérique / créatinine urinaire × phosphate sérique]} × 100 de <82%, excrétion fractionnelle de acide urique {[acide urique urinaire × créatinine sérique / créatinine urinaire × acide urique sérique] × 100} de> 15%, β2-microglobulinurie β2M & gt; 1000 μg / g de Cr, α1-microglobulinurie α1M & gt; 166 mg / g Cr, et niveau élevé de NAG dans l’urine NAG & gt; 593 U / g Cr Les seuils ci-dessus ont été sélectionnés sur la base des données précédemment rapportées par différents chercheurs [15, 30, 31] Les facteurs de risque potentiels de KTD ont été déterminés selon des études antérieures et collectés avec les données démographiques de base. dossiers [6, 27, 32, 33] Ils incluaient l’âge, le sexe, le poids corporel et la présence ou l’absence d’autres conditions médicales d’utilisation concomitante de médicaments néphrotoxiques comme le ganciclovir, le sulfaméthoxazole / triméthoprime et les anti-inflammatoires non stéroïdiens, la co-infection avec l’hépatite B, défini par antigène de surface de l’hépatite B positif, coïnfection avec l’hépatite C, définie par une charge virale positive du VHC, hypertension, définie par le traitement actuel avec des antihypertenseurs ou 2 mesures successives de pression artérielle systolique> 140 mmHg ou tension artérielle diastolique> 90 mmHg à la clinique, dyslipidémie, définie par le traitement actuel avec des agents hypolipidémiants ou 2 mesures successives de lipoprotéines de basse densité cho 140 mg / dl, cholestérol à lipoprotéines de haute densité & lt; 40 mg / dL, cholestérol total & gt; 240 mg / dL, triglycéride> 500 mg / dL Dans notre clinique, la pression artérielle et le poids corporel sont mesurés à chaque visite. utilisé les données sur ou le plus proche du jour de la collecte d’échantillons de sang / d’urine et le jour le plus proche, au plus tard 180 jours

Polymorphismes génétiques

Les SNP dans les gènes codant pour les transporteurs tubulaires ont été sélectionnés sur la base de leur signification fonctionnelle, des résultats de rapports précédemment publiés et / ou des fréquences d’allèles mineurs rapportés> 5% dans les données de fréquence allélique [13-15, 21, 28] pour les Japonais ont été obtenus à partir de la base de données japonaise JSNP Polymorphisms Single Nucleotide [34] Les 14 SNP sélectionnés étaient 1 ABCC2 encode MRP2 -24C → T dans le promoteur; rs717620; 1249G → A Val417Ile; rs2273697; 2366C → T Ser789Phe; RS56220353; 2934G → A Ser978Ser; rs3740070, 2 ABCC4 code pour MRP4 559G → T Gly187Trp; rs11568658; 912G → T Lys304Asn; rs2274407; 2269G → A Glu757Lys; rs3765534; 3348A → G Lys1116Lys; RS1751034; 4135T → G [dans la région 3 ‘non traduite UTR; RS3742106]; 4976T → C 3 ‘UTR; rs1059751, 3 ABCC10 code pour MRP10 526G → un intron; RS9349256; 2759T → C Ile920Thr; rs2125739, 4 SLC22A6 code OAT1 180C → T Asn60Asn; rs11568630, et 5 ABCB1 code pour la P-glycoprotéine 2677T → A / G A: Ser893Thr, G: Ser893Ala; rs2032582

Analyses pharmacogénétiques

L’ADN génomique a été extrait des leucocytes du sang périphérique en utilisant le protocole décrit dans la feuille jointe au QIAamp DNA MiniKit Qiagen, Valencia, Californie. Tout le génotypage a été effectué par discrimination allélique en utilisant des tests TaqMan 5′-nuclease avec des protocoles standards. Applied Biosystems, Foster City, Californie Les séquences d’amorces et de sondes sont disponibles sur demande

Analyses statistiques

Les caractéristiques initiales ont été comparées entre les patients avec KTD et sans dysfonctionnement tubulaire par le test t de Student pour les variables continues et soit par le test χ2 soit par le test exact de Fisher pour les variables catégoriques Les comparaisons statistiques pour les fréquences génotypiques entre 2 groupes ont été faites Tableau 2 × 6 du test exact de Fisher pour RS2032582 Les associations entre génotypes et KTD ont été testées par des analyses de régression logistique univariées et multivariées. L’impact d’autres variables a été estimé avec une analyse univariée, et celles avec P & lt; 20 ont été incorporés dans l’analyse multivariée, en plus des données démographiques de base telles que l’âge et le sexe. La signification statistique a été définie à la valeur P bilatérale & lt; 05 Nous avons utilisé des odds ratios ORs et des intervalles de confiance à 95% IC à 95% pour estimer l’impact de chaque variable sur KTD Le logiciel Haploview a été utilisé pour tester l’équilibre de Hardy-Weinberg et les analyses d’haplotypes ABCC2 et ABCC4 Toutes les autres analyses statistiques ont été réalisées pour les sciences sociales ver 170 SPSS, Chicago, Illinois

RÉSULTATS

Un total de 190 patients ayant fourni des échantillons de sang et d’urine satisfaisant aux critères d’inclusion et d’exclusion ont été inclus dans l’étude. Figure 1 KTD a été diagnostiqué chez 19 des 190 patients 10% Les caractéristiques de base et les données de laboratoire dans le tableau 1, les patients avec KTD étaient plus âgés P & lt; 001, avaient un poids corporel plus petit P = 006 et un DFGe inférieur P = 003, et étaient plus susceptibles d’être hypertendus que les patients ayant une fonction tubulaire normale P = 088 La durée médiane du traitement par le ténofovir était de 715 semaines intervalle interquartile [IQR]: 368-1092 semaines pour l’ensemble de la population étudiée, qui n’était pas différente entre les deux groupes P = 888

Tableau 1Caractéristiques des patients avec et sans dysfonction tubulaire rénale Patients atteints de KTD n = 19 Patients avec fonction tubulaire normale n = 171 P Variables pour les marqueurs tubulaires rénaux Urinaire β2M μg / g Cra 3066 2247-10068 2092 1142-5362 & lt; 001 Urinaire α1M mg / g Cra 265 198-374 795 502-119 & lt; 001 NAG urinaire U / g Cra 9 62-143 374 284-495 & lt; 001 Résorption tubulaire fractionnée de la phosphatée 839 817-92 919 888-944 & lt; 001 Excrétion fractionnée de uric acida 97 81-124 64 50-90 & lt; 001 Contribution de chaque paramètre à KTD urinaire β2M & gt; 1000 μg / g Cr, No% 19 100 21 123 & lt; 001 Urinaire α1M & gt; 166 mg / g Cr, No% 18 947 17 99 <001 NAG urinaire> 593 U / g Cr, No% 17 895 23 135 & lt; 001 Résorption tubulaire fractionnelle du phosphate <82%, n °% 5 263 2 12 & lt; 001 Excrétion fractionnée d'acide urique> 15%, Non% 2 105 4 23 112 Caractéristiques Sexe Homme, Non% 18 947 166 971 473 Agea 60 41-62 38 32-42 & 001 Voie de transmission Contact homosexuel, Non % 16 842 153 895 528 Poids kga 56 535-665 672 581-75 006 Taux de filtration glomérulaire estimé mL / minutes / 173 m2a 755 628-935 877 775-98 003 Sérum créatinine mg / dLa 085 068-096 080 073-088 168 Numération des lymphocytes CD4 μLa 380 194-501 379 275-533 261 Phosphate sérique mg / dLa 34 27-37 32 29-36 815 Acide urique sérique mg / dLa 47 42-57 56 48-64 080 Médicament néphrotoxique, Non% 2 105 12 70 420 Hépatite C, Non% 0 0 3 18 728 Hépatite B, Non% 2 105 24 14 501 Dyslipidémie, Non% 4 211 54 316 253 Hypertension, Non % 8 421 42 246 088 Protéine C réactive mg / dLa 007 003-028 007 003-016 277 Durée du traitement avec TDF semainesa 603 177-1154 733 377-1091 888 Patients atteints de KTD n = 19 Patients ayant une fonction tubulaire normale n = 171 P Valeur Variables pour les marqueurs tubulaires rénaux Urinaire β2M μg / g Cra 3066 2247-10068 2092 1142-5362 & lt; 001 Urinaire α1M mg / g Cra 265 198-374 795 502-119 & lt; 001 NAG urinaire U / g Cra 9 62- 143 374 284-495 & lt; 001 Résorption tubulaire fractionnée de la phosphatée 839 817-92 919 888-944 & lt; 001 Excrétion fractionnée de l’acide urique 97 81-124 64 50-90 & lt; 001 Contribution de chaque paramètre à KTD Urinaire β2M & gt; 1000 μg / g Cr, No% 19 100 21 123 & lt; 001 Urinaire α1M & gt; 166 mg / g Cr, No% 18 947 17 99 <001 NAG urinaire> 593 U / g Cr, No% 17 895 23 135 & lt; 001 Résorption tubulaire fractionnelle du phosphate <82%, n °% 5 263 2 12 & lt; 001 Excrétion fractionnée d'acide urique> 15%, Non% 2 105 4 23 112 Caractéristiques Sexe Homme, Non% 18 947 166 971 473 Agea 60 41-62 38 32-42 & 001 Voie de transmission Contact homosexuel, Non % 16 842 153 895 528 Poids kga 56 535-665 672 581-75 006 Taux de filtration glomérulaire estimé mL / minutes / 173 m2a 755 628-935 877 775-98 003 Sérum créatinine mg / dLa 085 068-096 080 073-088 168 Numération des lymphocytes CD4 μLa 380 194-501 379 275-533 261 Phosphate sérique mg / dLa 34 27-37 32 29-36 815 Acide urique sérique mg / dLa 47 42-57 56 48-64 080 Médicament néphrotoxique, Non% 2 105 12 70 420 Hépatite C, Non% 0 0 3 18 728 Hépatite B, Non% 2 105 24 14 501 Dyslipidémie, Non% 4 211 54 316 253 Hypertension, Non % 8 421 42 246 088 Protéine C réactive mg / dLa 007 003-028 007 003-016 277 Durée du traitement avec TDF semainesa 603 177-1154 733 377-1091 888 Abréviations: KTD, dysfonction tubulaire rénale; NAG, N-acétyl-ß-d-glucosaminidase; TDF, ténofovir disoproxil fumaratea Gamme interquartile médianeVue Large

Figure 1View largeDownload slidePatient inscription Abréviations: ALT, alanine transaminase; DRV / r, darunavir boosté au ritonavir; VIH, virus de l’immunodéficience humaine; TDF / FTC, ténofovir / emtricitabine; LSN, limite supérieure de la normaleFigure 1View largeTéléchargement diapositive Inscriptions aux patients Abréviations: ALT, alanine transaminase; DRV / r, darunavir boosté au ritonavir; VIH, virus de l’immunodéficience humaine; TDF / FTC, ténofovir / emtricitabine; ULN, limite supérieure de la table normale 2 résume la distribution des génotypes des gènes ABCC2, ABCC4, ABCC10, SLC22A11 et ABCB1 dans les 2 groupes Tous les polymorphismes étaient en équilibre de Hardy-Weinberg avec une valeur P de coupure de 001 En analyse SNP simple, un un pourcentage plus élevé de patients atteints de KTD a été trouvé parmi le génotype CC à la position -24 et le génotype AA à la position 1249 de l’ABCC2, comparativement aux patients avec d’autres génotypes -24 CC; 143% [chez 18 des 126 patients] vs 16% [chez 1 des 64 patients]; P = 004; 1249 AA; 429% [chez 3 des 7 patients] vs 87% [chez 16 des 183 patients]; P = 023, respectivement Le pourcentage de patients atteints de KTD était également plus élevé chez les génotypes AA à la position 2677 d’ABCB1, comparativement aux patients avec d’autres génotypes 2677 AA; 429% [chez 3 des 7 patients] vs 87% [chez 16 des 183 patients]; P = 023 KTD était marginalement associé au génotype AA à la position 559 et au génotype GG à la position 4976 de ABCC4 P = 112 et 090, respectivement

Tableau 2 Fréquences de génotype chez ABCC2, ABCC4, ABCC10, SLC22A6 et ABCB1 chez les patients avec et sans dysfonction tubulaire rénale Génotype Acide aminé Patients avec KTD n = 19 Patients avec fonction tubulaire normale n = 171 P Valuea ABCC2 MRP2 -24 C → T, rs717620 C / C 18 947 108 632 C / T 1 53 52 304 018 T / T 0 0 11 64 1249 G → A, rs2273697 Val417Ile G / G 11 579 133 778 A / G 5 263 34 199 017 A / A 3 158 4 23 2366 C → T, rs56220353 Ser789Phe C / C 19 100 167 977 C / T 0 0 3 18 1000 T / T 0 0 1 06 2934 G → A, rs3740070 Ser978Ser G / G 18 947 159 930 G / A 1 53 11 64 1000 A / A 0 0 1 06 ABCC4 MRP4 559 G → T, rs11568658 Gly187Trp G / G 13 684 133 778 G / T 4 211 34 199 126 T / T 2 105 4 23 912G → T, rs2274407 G / G 13 684 102 596 T / G 6 316 52 304 461 T / T 0 0 17 99 2269 G → A, rs3765534 Glu757Lys G / G 15 789 129 754 G / A 2 105 35 205 241 A / A 2 105 7 41 3348 A → G , rs1751034 Lys1116Lys A / A 13 684 98 573 A / G 3 158 58 339 185 G / G 3 158 15 88 4135 T → G, rs3742106 T / T 6 316 46 269 T / G 7 368 79 462 707 G / G 6 316 46 269 4976T → C, rs1059751 T / T 6 316 46 269 T / C 5 263 86 503 090 C / C 8 421 39 228 ABCC10 MRP7 526G → A, rs9349256 G / G 4 211 32 187 A / G 9 474 65 38 569 A / A 6 316 74 433 2759T → C, rs2125739 Ile920Thr T / T 15 714 131 775 T / C 6 286 31 183 488 C / C 0 0 7 41 SLC22A6 OAT1 180C → T, rs11568630 C / C 18 947 164 959 C / T 1 53 7 41 577 T / T 0 0 0 0 ABCB1 P-glycoprotéine 2677T → A / G, rs2032582 A: Ser893ThrG: Ser893Ala T / T 0 0 47 275 T / A 3 158 14 82 G / G 4 211 36 211 002 G / T 8 421 46 269 G / A 1 53 24 14 A / A 3 158 4 23 Génotype Acide aminé avec KTD n = 19 Patients avec fonction tubulaire normale n = 171 P Valuea ABCC2 MRP2 -24 C → T, rs717620 C / C 18 947 108 632 C / T 1 53 52 304 018 T / T 0 0 11 64 1249 G → A, rs2273697 Val417Ile G / G 11 579 133 778 A / G 5 263 34 199 017 A / A 3 158 4 23 2366 C → T, rs56220353 Ser789Phe C / C 19 100 167 977 C / T 0 0 3 18 1000 T / T 0 0 1 06 2934 G → A, rs3740070 Ser978Ser G / G 18 947 159 930 G / A 1 53 11 64 1000 A / A 0 0 1 06 ABCC4 MRP4 559 G → T, rs 11568658 Gly187Trp G / G 13 684 133 778 G / T 4 211 34 199 126 T / T 2 105 4 23 912G → T, rs2274407 G / G 13 684 102 596 T / G 6 316 52 304 461 T / T 0 0 17 99 2269 G → A, rs3765534 Glu757Lys G / G 15 789 129 754 G / A 2 105 35 205 241 A / A 2 105 7 41 3348 A → G, rs1751034 Lys1116Lys A / A 13 684 98 573 A / G 3 158 58 339 185 G / G 3 158 15 88 4135 T → G, rs3742106 T / T 6 316 46 269 T / G 7 368 79 462 707 G / G 6 316 46 269 4976T → C, rs1059751 T / T 6 316 46 269 T / C 5 263 86 503 090 C / C 8 421 39 228 ABCC10 MRP7 526G → A, rs9349256 G / G 4 211 32 187 A / G 9 474 65 38 569 A / A 6 316 74 433 2759T → C, rs2125739 Ile920Thr T / T 15 714 131 775 T / C 6 286 31 183 488 C / C 0 0 7 41 SLC22A6 OAT1 180C → T, rs11568630 C / C 18 947 164 959 C / T 1 53 7 41 577 T / T 0 0 0 0 ABCB1 P- glycoprotéine 2677T → A / G, rs2032582 A: Ser893ThrG: Ser893Ala T / T 0 0 47 275 T / A 3 158 14 82 G / G 4 211 36 211 002 G / T 8 421 46 269 G / A 1 53 24 14 A / A 3 158 4 23 Abréviation: KTD, dysfonctionnement tubulaire rénal Par test exact de FisherVoir Grand

Association des génotypes avec KTD

L’analyse univariée a montré une association significative entre la KTD et les patients avec le génotype CC à la position -24 OR, = 1050; IC à 95%, 1369-8055; P = 024 et les patients avec le génotype AA à la position 1249 OR, 7828; IC à 95%, 1609-3810; P = 011 de ABCC2 Tableau 3 Le risque de KTD était plus élevé chez les patients ayant à la fois le génotype CC à la position -24 et le génotype AA à la position 1249 OR, 3188; IC à 95%, 3131-3245; P = 003 Le génotype AA à la position 2677 d’ABCB1 était également significativement associé à KTD OR, 7828; IC à 95%, 1609-3810; P = 011 En outre, la vieillesse par 1 an, OR, 1165; IC à 95%, 1100-1233; P & lt; 001, faible poids corporel par 1 kg de diminution, OR, 1076; IC à 95%, 1021-1135; P = 007, et faible DFGe par 1 mL / minutes / 173 m2 de diminution, OR, 1052; IC à 95%, 1016-1090; P = 004 étaient également associés à KTD

Tableau 3Analyse multidimensionnelle des risques de dysfonctionnement tubulaire rénal chez les patients infectés par le VIH traités par le ténofovir Caractéristique OU 95% CI P Valeur Sexe féminin 1844 204-1667 586 Âge par année 1165 1100-1233 & lt; 001 Poids par 1 kg décrément 1076 1021- 1135 007 Compte de CD4 par décrément de 1 / μL 1002 999-1004 261 Ligne de base DFGe par 1 mL / minutes / 173 m2décrément 1052 1016-1090 004 Utilisation concomitante de médicaments néphrotoxiques 1559 322-7555 581 Hépatite B 0721 156-3319 674 Protéine C-réactive par 1 mg / dL 1551 689-3494 289 Hypertension 2234 843-5922 106 Dyslipidémie 0578 183-1823 349 Durée du traitement avec ténofovir disoproxilfumarate semaines 0999 992-1007 888 ABCC2 -24 CC 1050 1369-8055 024 1249 AA 7828 1609-3810 011 -24 CC plus 1249 AA 3188 3131-3245 003 2934 GG 1358 167-1107 775 ABCC4 559 TT 4912 837-2881 078 912 TT 1466 531-4042 460 2269 AA 2756 530-1434 228 3348 GG 1950 510-7463 329 4135 GG 1254 450-3494 665 4976 CC 2462 925-6547 071 ABCC10 526 GG 1158 360-3725 805 2759 TT 0619 220-1738 363 ABCB1 2677 AA 7828 1609-3810 011 Caractéristique OR 95% CI P Valeur Sexe féminin 1844 204-1667 586 Âge par 1 an 1165 1100-1233 & lt; 001 Poids par 1 kg décrément 1076 1021-1135 007 Compte de CD4 par 1 / μL décrément 1002 999-1004 261 Ligne de base eGFR par 1 mL / minutes / 173 m2decrement 1052 1016-1090 004 Utilisation concomitante de médicaments néphrotoxiques 1559 322-7555 581 Hépatite B 0721 156-3319 674 Protéine C-réactive par 1 mg / dL 1551 689-3494 289 Hypertension 2234 843-5922 106 Dyslipidémie 0578 183-1823 349 Durée du traitement avec ténofovir disoproxilfumarate semaines 0999 992-1007 888 ABCC2 -24 CC 1050 1369-8055 024 1249 AA 7828 1609-3810 011 -24 CC plus 1249 AA 3188 3131-3245 003 2934 GG 1358 167-1107 775 ABC C4 559 TT 4912 837-2881 078 912 TT 1466 531-4042 460 2269 AA 2756 530-1434 228 3348 GG 1950 510-7463 329 4135 GG 1254 450-3494 665 4976 CC 2462 925-6547 071 ABCC10 526 GG 1158 360-3725 805 2759 TT 0619 220-1738 363 ABCB1 2677 AA 7828 1609-3810 011 Abréviations: CI, intervalle de confiance; DFGe: taux de filtration glomérulaire estimé; VIH, virus de l’immunodéficience humaine; OR, odds ratioa En raison de la faible prévalence des allèles mineurs, rs56220353, rs11568630, et rs2274407 n’ont pas été inclus dans cette analyse. Voir Grandes analyses multivariées identifiées génotype CC à la position -24 et génotype AA à la position 1249 de ABCC2 comme risques indépendants pour KTD après ajustement pour le sexe , âge, poids, DFGe et TA ajusté pour l’hypertension, = 2008; IC à 95%, 1711-2357; P = 017; OR ajusté, 1621; IC à 95%, 1630-1611; P = 017, respectivement Tableau 4 Les patients avec les deux homozygotes susmentionnés présentaient un OR ajusté plus élevé dans une analyse multivariée ajustée OR, 3844; IC à 95%, 2051-7204; P = 015; Tableau 4 D’autre part, le génotype AA à la position 2677 d’ABCB1 n’était pas significativement associé à la KTD en analyse multivariée ajustée pour les variables susmentionnées ajustées OR, 1686; IC à 95%, 163-1743; P = 661

Tableau 4Analyse multivariée du risque de dysfonctionnement tubulaire du rein induit par le ténofovir chez les homozygotes à -24 et 1249 d’ABCC2 chez les patients infectés par le VIH ABCC2 ajusté OR 95% CI Valeur Homozygote à -24 CC 2008 1711-2357 017 Homozygote à 1249 AA 1621 1630-1611 017 Homozygotes à -24 CCplus 1249 AA 3844 2051-7204 015 ABCC2 Ajusté OU 95% CI P Valeur Homozygote à -24 CC 2008 1711-2357 017 Homozygote à 1249 AA 1621 1630-1611 017 Homozygotes à -24 CCplus 1249 AA 3844 2051-7204 015 Chaque variable a été ajustée en fonction du sexe, de l’âge, du poids, du taux de filtration glomérulaire estimé et de l’hypertension. Abréviations: IC, intervalle de confiance; OU, odds ratio

Association d’Haplotypes à ABCC2 et ABCC4 avec KTD

La construction de l’haplotype a été réalisée avec les 4 SNP identifiés avec P & lt; 10 en analyse univariée: ABCC2, -24 C → T, 1249 G → A; ABCC4, 559 G / T, 4976T / C Tableau 4 Des haplotypes avec une fréquence de> 1% ont été analysés. L’haplotype CA de ABCC2 était significativement associé à la KTD OR, 2910 induite par TDF. IC à 95%, 1295-6221; P = 011, alors que l’haplotype ABCC2 TG était un haplotype protecteur OR, 0098; IC à 95%, 002-603; P = 003 L’haplotype ABCC4 TT était marginalement associé au KTD OR, 2497 induit par le ténofovir; IC à 95%, 902-6949; P = 077

DISCUSSION

La présente étude a démontré que le génotype CC en position -24 et le génotype AA en position 1249 du gène ABCC2 sont associés à la KTD induite par le ténofovir chez des patients japonais infectés par le VIH-1. L’effet des SNP était plus évident chez les patients Les résultats de cette étude résolvent la controverse à long terme sur le rôle des polymorphismes génétiques dans la KTD induite par le ténofovir et confirment l’effet des SNP dans le gène ABCC2 dans l’haplotype KTDCA induit par le ténofovir -24C, 1249A de ABCC2 a été associée à KTD induite par le ténofovir, alors que TG était un haplotype protecteur. Tableau 5 Izzedine et al [13] ont rapporté le rôle de l’haplotype CATC -24C, 1249A, 3563T, 3972C de ABCC2 dans KTD Cependant, 3563T n’a pas joué rôle dans cette analyse d’haplotype, car la prévalence de 3563T est de 0% chez les Japonais, selon les données HapMap, et l’haplotype avec seulement -24C plus 1249A présentait encore son effet sur la table KTD induite par le ténofovir 5; wwwhapmaporg L’association signalée entre la KTD induite par le ténofovir et 526G et 2759C de ABCC10 décrite par Pushpakom et al [21] n’a pas non plus été reproduite dans cette étude De plus, les SNP dans ABCC4, SLC22A6 et ABCB1 étudiés dans la présente étude n’ont pas montré de association avec le KTD induit par le ténofovir Tableau 3

375-1470 399 haplotype ABCC4 TT TT 176 79 2497 902-6949 077 Abréviations: CI, intervalle de confiance; KTD, dysfonction tubulaire rénale; OU, odds ratio; SNP, les polymorphismes mononucléotidiques et les valeurs de P sont pour les comparaisons de fréquences alléliques / haplotypes entre le dysfonctionnement tubulaire rénal et les groupes de contrôle. ViewThree aspects importants de notre étude sont importants Premièrement, c’est la première étude à notre connaissance qui élucide l’effet des SNP sur des KTD induites par le ténofovir menées dans un pays autre que les pays européens ou les États-Unis. Notre étude a examiné des patients japonais d’origine génétique différents des patients des études précédentes, qui consistaient principalement en blancs. Les SNP -24C et 1249A d’ABCC2 ont été spéculés pour corréler Dans les études précédentes, la présente étude a confirmé que ces SNP sont des facteurs de risque de KTD induite par le ténofovir chez les non-blancs. Le résultat que les SNP dans ABCC2 présentent un risque de KTD induite par le ténofovir peut également être appliqué aux patients ayant d’autres antécédents génétiques. qui hébergent les SNP -24C et 1249A Notamment, l’impact des SNP sur la KTD induite par le ténofovir pourrait être plus significatif chez les Africains et les Indiens que chez les Japonais ou les Blancs, considérant que les fréquences alléliques de -24C et 1249A sont plus élevées dans ces populations d’après les données HapMap -24C; Africains 969%, Indiens 926%, Japonais 808%, Blancs 819%, 1249A; Africains 217%, Indiens 307%, Japonais 89%, Blancs 237%; wwwhapmaporgEn second lieu, l’étude a été conçue pour évaluer l’effet exclusif des SNP sur la KTD induite par le ténofovir en excluant les facteurs prédisposant à la KTD, par exemple l’infection active, les tumeurs malignes, le diabète sucré et l’insuffisance rénale préexistante. Les patients qui ne présentaient pas de suppression virale du VIH-1 étaient également exclus. En outre, les patients inscrits étaient japonais seulement, ce qui a permis d’examiner une population étudiée avec un contexte génétique similaire. ténofovir / emtricitabine, ce qui a également permis d’évaluer plus précisément l’effet des SNP, car la concentration plasmatique du ténofovir est affectée par des antirétroviraux concomitants et la variation delta de la concentration plasmatique du ténofovir diffère probablement en présence de chaque médicament concomitant [26]. ont été examinés chez 190 patients dans cette étude A notre connaissance, le nombre de patients inscrits nts est la plus importante parmi les études qui ont jusqu’ici examiné l’effet des SNP sur la KTD induite par le ténofovir. Cette caractéristique a donc fourni à l’étude un pouvoir statistique plus élevé que les études antérieuresPourquoi les polymorphismes de l’ABCC2 sont-ils un risque de KTD induite par le ténofovir? est controversée si MRP2 joue un rôle dans l’excrétion du ténofovir via la membrane luminal [18, 20] Le mécanisme exact n’a pas encore été déterminé, mais nous spéculons 2 hypothèses. Premièrement, il pourrait y avoir des substances endogènes inconnues influençant la néphrotoxicité du ténofovir dans les tubules rénaux. En second lieu, le MRP2 peut en effet participer au transport du ténofovir, car diverses substances, dont le méthotrexate, sont des substrats du MRP2, et la mutation ABCC2 modifie l’excrétion de ces substances. [36, 37] D’autres études sont justifiées pour élucider le mécanisme exact de ces SNP sur KTD induite par le ténofovir En outre, l’impact de Ces SNPs sur KTD avec utilisation à long terme du TDF doivent être évalués dans des études prospectives. Plusieurs limitations doivent être reconnues. Premièrement, tous les polymorphismes dans les gènes des protéines de transport ciblées n’ont pas été examinés. D’autre part, les critères de diagnostic pour la KTD induite par le ténofovir ne sont pas uniformément établis sur le terrain et sont différents dans les études publiées. Les critères appliqués dans cette étude ne sont pas entièrement similaires à ceux utilisés dans les études antérieures qui examinaient le rôle des SNP dans la KTD induite par le ténofovir. Cependant, en excluant d’autres facteurs prédisposant à la KTD et en recrutant un grand nombre de patients, cette étude a réussi à une association claire entre les SNP et la KTD induite par le ténofovir, la présente étude a démontré L’évaluation de la fonction tubulaire rénale est plus lourde et plus coûteuse à surveiller que la créatinine sérique. Cependant, la surveillance de la fonction tubulaire est cliniquement importante, car la détection à long terme de la fonction tubulaire n’est pas détectée. dysfonctionnement tubulaire à court terme peut entraîner une ostéopénie prématurée due à l’atrophie du phosphate et à une progression accélérée de la dysfonction rénale Une surveillance étroite de la fonction tubulaire est justifiée chez les patients traités par ABCC2 -24C et 1249A sous TDF

Remarques

Remerciements Les auteurs remercient Ryo Yamada, Takuro Shimbo, Fumihiko Hinoshita, Yoshimi Kikuchi, Katsuji Teruya, Kunihisa Tsukada, Junko Tanuma, Hirohisa Yazaki, Haruhito Honda, Ei Kinai, Koji Watanabe, Takahiro Aoki, Daisuke Mizushima, Yohei Hamada, Michiyo Ishisaka et Mikiko. Ogata, Mai Nakamura, Akiko Nakano, Fumihide Kanaya et tous les autres membres du personnel du AIDS Clinical Centre pour leur aide à la réalisation de cette étude. Soutien financier Ce travail a été soutenu par une subvention du Ministère japonais de la Santé pour la recherche sur le SIDA. Travail et Bien-être H23-AIDS-001, et le Centre mondial d’excellence Centre mondial d’éducation et de recherche sur la lutte contre le SIDA du ministère japonais de l’Education, des Sciences, du Sport et de la CulturePosts potentiels d’intérêt des subventions de MSD KK, d’Abbott Japon, de Janssen Pharmaceutical KK, de Pfizer et de Roche Diagnostics KK; a reçu des honoraires d’Astellas Pharmaceutical KK, de Bristol-Myers KK, de Daiichisankyo, de Dainippon Sumitomo Pharma, de GlaxoSmithKline, de KK, de Taisho Toyama Pharmaceutical, de Torii Pharmaceutical et de ViiV Healthcare HG a reçu des honoraires de MSD KK, Abbott Japon et Torii Pharmaceutical , Roche Diagnostics KK, et ViiV Healthcare Les autres auteurs ne déclarent aucun conflit d’intérêt Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits d’intérêts potentiels Conflits que les éditeurs considèrent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués