Les destinataires du vaccin contre la «grippe porcine» ont des réponses de neutralisation améliorées au nouveau virus de la grippe HN

Contexte Le monde fait face à une nouvelle pandémie de grippe HN Une pandémie avec un virus grippal similaire a entraîné la vaccination de près d’un million de personnes Nous avons émis l’hypothèse que la vaccination contre la grippe porcine améliorerait les réponses immunitaires à la nouvelle souche HN. Un échantillon prospectif et volontaire d’employés âgés de ⩾ ans dans un hôpital de cancérologie pour enfants en août a été évalué pour les anticorps contre le virus de la grippe pandémique HN et le virus de la grippe saisonnière contre le virus grippal HN. avaient un titre considéré comme séroprotecteur et pandémique HN a un titre séroprotecteur Ces anticorps ont été efficaces pour neutraliser le virus HN de la grippe saisonnière en% du nombre de participants but, mais seuls% avaient des titres neutralisants détectables contre le virus pandémique HN de la grippe. reçu le vaccin “grippe porcine” Recei pt de ce vaccin a significativement amélioré les réponses de neutralisation; Conclusion: Dans cette cohorte, les personnes âgées de ⩾ ans présentaient une forte immunité contre le virus de la grippe saisonnière HN. Ces anticorps étaient réactifs de manière croisée. mais non neutralisant contre la souche pandémique HN influenza La réception d’un vaccin contre un virus apparenté a significativement amélioré la capacité de neutralisation de ces réponses, suggérant qu’une vaccination homologue contre le virus de la grippe pandémique HN aurait un effet similaire

Le monde fait face à une nouvelle pandémie de grippe pour la première fois dans & gt; [H] Un virus grippal triple réassorti du sous-type HN a émergé d’un réservoir animal et s’est répandu dans le monde entier. H hémagglutinine HA, la protéine de surface contre laquelle sont dirigées la plupart de nos réponses neutralisantes “Lignée porcine Ces virus grippaux HN” classiques “sont endémiques chez les porcs et proviennent d’une souche progénitrice qui est entrée dans la population porcine, le même virus qui a causé une pandémie humaine ayant pour résultat & gt; millions de décès L’épidémiologie de cette pandémie naissante a été différente de celle des récentes épidémies saisonnières, la majorité des cas et des hospitalisations étant identifiés chez les enfants et les jeunes adultes. Des maladies graves ont souvent été observées dans cette tranche d’âge chez les personnes sans Cependant, contrairement à la grippe saisonnière, où la majorité des hospitalisations et des décès sont parmi les personnes âgées , <% des hospitalisations pour grippe pandémique HN ont concerné des personnes âgées de ⩾ ans, principalement parmi celles ayant des affections chroniques sous-jacentes. conditions médicales La raison de ce relatif épargnant des personnes âgées n'est pas claire mais est probablement liée aux réponses d'anticorps croisées qui fournissent une certaine mesure d'immunité Que cet anticorps réagisse croisé d'une infection antérieure avec un virus apparenté spécifique ou si c'est le résultat de l'accumulation d'expositions à des virus non apparentés qui partagent des épitopes avec la pandémie Une épidémie de grippe HN de la lignée porcine «classique» a provoqué une alerte pandémique Plus de recrues militaires à Fort Dix, dans le New Jersey, ont été infectées, mais le virus ne s'est pas propagé. Au-delà de la base militaire Les craintes d'une répétition de la pandémie désastreuse ont cependant déclenché une campagne de vaccination rapide et massive, entraînant la vaccination de millions de personnes, soit près du quart de la population américaine Analyse phylogénétique de l'hémagglutinine des virus de la grippe HN qui se sont propagés chez les humains au cours du siècle dernier démontre que les hémagglutinines des virus qui circulent chez les humains sont plus étroitement liées à la souche pandémique HN que les souches saisonnières récentes, suggérant que l'exposition à ces virus dans la petite enfance pourrait fournir une immunité de protection croisée et pourrait aider à expliquer la distribution par âge Figure Cependant, le A / New Jersey / grippe stra L'épidémie de Fort Dix est le virus humain le plus étroitement apparenté à la souche pandémique HN. Ainsi, la réception du vaccin pourrait présenter un certain avantage pour les personnes exposées à la grippe pandémique HN Nous avons entrepris cette étude pour définir la réponse anticorps spécifique de la grippe chez les personnes âgées et de déterminer si la réception du vaccin «grippe porcine» influe sur ces réponses

Figure Vue largeDispositif Diagramme Phylogénétique construit par la méthode de distance de la région HA des hémagglutinines de virus pandémiques HN pandémiques humaines et pandémiques représentatifs de l’actuel. Voir grandDisque de téléchargementArbre prophylogénétique construit par la méthode de distance de la région HA des hémagglutinines du représentant l’épidémie humaine et les virus de la grippe pandémique HN d’aujourd’hui

Méthodes

Conception de l’étude et participants Les employés de l’Hôpital de recherche pour enfants St Jude et leurs conjoints étaient admissibles au recrutement s’ils étaient âgés de ⩾ ans Parmi les employés choisis au hasard pour cette étude,% ont choisi de participer et les conjoints se sont portés volontaires. La population étudiée a été choisie en partie pour des raisons de commodité et en partie parce que le vaccin contre la grippe porcine a été administré aux employés de l’hôpital dans le cadre d’un essai clinique, et bon nombre de ces personnes vaccinées travaillent encore à l’hôpital. L’inscription à l’hôpital a eu lieu fin juillet et début août, avant la circulation généralisée du virus pandémique HN de la grippe à Memphis. Caractéristiques démographiques et éléments de l’histoire, y compris l’âge, le sexe, les antécédents médicaux chroniques prédisposant à l’hospitalisation grippale Comité des pratiques de vaccination , et réception des Le vaccin Luenza dans le vaccin saisonnier ou le vaccin contre la grippe porcine a été recueilli de manière normalisée selon un protocole approuvé par le comité d’examen institutionnel. Des échantillons de sérum prélevés anonymement au Centre médical pour enfants Le Bonheur pendant une étude sur les séroresponses ont été utilisés comme témoins. Les principaux résultats à étudier étaient l’hémagglutination-inhibition HAI et la microneutralisation. Titres MN stratifiés selon l’âge et par la réception préalable du vaccin «grippe porcine». Des échantillons de sérum ont été traités avec l’enzyme de destruction des récepteurs. ; Scientifique et ont été inactivés par la chaleur avant l’analyse pour l’anticorps spécifique de la grippe en utilisant un dosage titré HAI standard Pour la détermination des titres HAI, les stocks individuels de virus grippaux HN exprimant l’hémagglutinine des souches A / Brisbane // A / California // ont été ajustés. Les hémagglutinines ont été incubées avec des échantillons sériques dilués pour h à ° C. Les globules rouges de poulet% ont été ajoutés aux plaques et les titres HAI, rapportés comme l’inverse de la dilution finale du sérum inhibant l’hémagglutination, ont été enregistrés min. , des échantillons de sérum dilués dans des milieux infectieux ont été incubés avec des stocks viraux individuels doses infectieuses pour% des puits de culture tissulaire par mL [TCID mL-] exprimant des hémagglutinines de A / Brisbane // A / California // pour h Confluent Madin Darby MDCK monocouches x cellules / ml ont été rincées avec une solution saline tamponnée au phosphate et ont été exposées à des mélanges de sérum-virus pour h Inoculum a été retiré, et les cellules ont été incubées pour h dans un milieu infectieux additionné de μg / mL de cellules TPCK-trypsine ont été fixées avec du% d’acétone, et la nucléoprotéine du virus de la grippe a été détectée en utilisant des anticorps monoclonaux dirigés contre la nucléoprotéine Millipore Fisher; numéro de catalogue MAB à une dilution de: comme décrit ailleurs Les titres MN sont rapportés comme l’inverse de la dilution finale qui neutralise le virus à un point final de neutralisation défini comme décrit ailleurs Analyses statistiquesLes données de tous les participants ont été incluses dans les analyses. Les titres moyens ont été calculés pour l’hémagglutinine et le MN. Dans les cas où tous les titres étaient inférieurs au seuil de détection & lt;: une valeur de “” a été utilisée pour les comparaisons Pour l’hémagglutinine, un titre moyen géométrique de ⩾ était considéré comme “protecteur”; pour les MN, un titre de ⩾ a été utilisé comme corrélat de la séroprotection Les variables catégorielles ont été comparées à l’aide de χ tests avec correction de Yates et le test U de Mann-Whitney a été utilisé pour les variables continues. ; ont été considérés statistiquement significatifs SigmaStat pour Windows SysStat Software, la version a été utilisée pour toutes les analyses statistiques

Résultats

Sujets Cet échantillon de volontaires était composé de femmes et d’hommes et avait une moyenne d’âge de plusieurs années. Des conditions médicales chroniques prédisposant aux complications de la grippe étaient présentes chez les sujets. Parce que l’échantillon provenait principalement d’employés d’un hôpital pour enfants cancéreux, Il s’agissait d’une population fortement vaccinée, avec% de sujets ayant reçu le vaccin saisonnier l’année précédente et% ayant reçu le vaccin contre la grippe porcine pendant la campagne nationale dans les réponses aux anticorps contre les virus grippaux HN saisonniers et pandémiques. anticorps anti-influenza par HAI contre la souche saisonnière de grippe HN Tableau Le titre moyen géométrique a tendance à augmenter avec l’âge, et% des participants avaient un titre which, qui est considéré comme étant séroprotecteur Figure A Ceci était spécifique à cette population âgée et n’était pas un artefact du test utilisé, car les enfants inclus en tant que sujets témoins avaient un Des niveaux similaires d’anticorps ont été détectés contre la nouvelle souche de grippe pandémique HN, avec% atteignant un titre séroprotecteur. Figure A Aucune différence dans aucun groupe d’âge n’a pu être déterminée entre les réponses HAI aux souches saisonnières et pandémiques de grippe HN. Les échantillons sériques de contrôle des enfants ne présentaient aucun anticorps détectable contre la grippe pandémique HN. L’étude ayant été menée avant la disponibilité du vaccin monovalent contre la grippe HN ou la circulation généralisée de la grippe pandémique HN à Memphis, le les réponses immunitaires à la grippe HN représentent probablement des réponses d’anticorps à réaction croisée provenant d’une infection ou d’une vaccination antérieure

Table View largeTélécharger slideProduits moyens géométriques GMT à la grippe, selon le groupe d’âge et la table de titrage View largeTélécharger slideProduits moyens géométriques GMT à la grippe, selon le groupe d’âge et le dosage

Figure View largeToile de lecture Titres anticorps par hémagglutination-inhibition HAI A et microneutralisation MN B méthodes contre les virus HN saisonnières HN et pandémiques HN, stratifiées par âge patient en années La ligne pointillée du panel A représente le point de rupture de la séroprotection présuméeFigure View largeTélécharger slideAntibody titers par hemagglutination-inhibition HAI A et microneutralisation MN B méthodes contre le virus HN saisonnier HN et pandémique HN, stratifié par âge du patient en années La ligne pointillée dans le panneau A représente le point de rupture pour la séroprotection présuméeNeutralisation des anticorps contre la grippe saisonnière HN, telle que mesurée Les titres moyens géométriques ne sont pas significativement différents selon les HAI et les MN pour tous les groupes d’âge P = pour les années d’âge, P = pour l’âge – ans, et P = pour l’âge ⩾ ans Cependant, les réponses MN au pande Les micro-influenza HN étaient significativement plus faibles que les titres correspondants au graphique et au tableau HN de la grippe saisonnière et étaient également significativement plus faibles que les titres mesurés par HAI pour tous les groupes d’âge P & lt; pour les années d ‘âge, P & lt; pour les années d ‘âge, et P = pour les ⩾ ans Dans l’ ensemble,% des participants avaient des titres de MN to: à la souche saisonnière de la grippe HN, comparativement à seulement% à la souche pandémique HN P & lt; Nous concluons à partir de ces données que les personnes âgées & gt; Les anticorps anti-grippaux HN peuvent présenter des taux élevés d’anticorps spécifiques de la grippe, mais ces réponses diffèrent en termes de qualité, car elles neutralisent mal la souche pandémique de grippe HN. Effets de la vaccination contre la grippe porcine Effet de la vaccination contre la grippe A / New Jersey / HN à la fois sur les réponses anticorps totales spécifiques au virus et sur les réponses neutralisantes Parmi cet échantillon de volontaires,% des sujets ont reçu le vaccin «grippe porcine» chez les receveurs. Cependant, les receveurs étaient plus susceptibles d’avoir été vaccinés avec le vaccin contre la grippe saisonnière. Malgré ce taux plus élevé d’absorption du vaccin, les taux d’anticorps contre la souche saisonnière du virus grippal HN contenue dans le vaccin contre la grippe saisonnière étaient plus élevés. le vaccin n’a pas différé entre les groupes par HAI assay titre moyen géométrique des receveurs, [% intervalle de confiance {CI}, -]; titre moyen géométrique des non-receveurs, [% CI, -]; P = De même, le pourcentage de participants atteignant un titre de ou par le test MN ne diffère pas selon le statut de vaccination.

Table View largeTélécharger slideCaractéristiques de la population étudiée par Vaccination StatusTable Voir en grandDisque de téléchargementCaractéristiques de la population étudiée par statut vaccinal

Figure View largeTélécharger les titres de microneutralisation contre le HN saisonnier et les virus de la grippe pandémique HN, stratifiés par la réception du vaccin «grippe porcine» dans les barres représentent des échantillons sériques atteignant des titres de ⩾ et des échantillons sériques atteignant des titres ⩾ Un astérisque * indique une différence significative P & lt ; Les titres de microneutralisation contre les virus de la grippe saisonnière HN et pandémique HN, stratifiés par la réception du vaccin “grippe porcine” dans les barres représentent des échantillons de sérum atteignant des titres de ⩾ et échantillons de sérum atteignant des titres ⩾ Un astérisque * indique une différence significative P & lt; par rapport aux sujets qui n’ont pas reçu le vaccin «grippe porcine» Lorsque les réponses contre la grippe HN ont été évaluées, elles étaient similaires par HAI entre les receveurs du vaccin et ceux qui n’ont pas reçu le titre moyen géométrique du vaccin [% CI, -] ; titre moyen géométrique des non-receveurs, [% CI, -]; P = Cependant, les taux d’anticorps neutralisants contre la grippe pandémique HN ont été plus élevés avec le test MN chez les receveurs du vaccin, avec un titre ⩾, par rapport à ceux qui n’ont pas reçu le vaccin, et des receveurs ont obtenu un titre ⩾, par rapport à non-receveurs Figure B Seule la comparaison des titres à ⩾ était statistiquement significative P = Nous concluons de ces données que la réception du vaccin «grippe porcine» entraîne des réponses de neutralisation améliorées contre la souche pandémique HN de la grippe

Discussion

ates Cependant, nos données suggèrent que la vaccination contre une souche homologue ou même étroitement liée est susceptible de stimuler significativement les réponses neutralisantes à la grippe pandémique HN Les données limitées publiées à ce jour sur la vaccination avec le vaccin monovalent contre la grippe HN montrent de bonnes réponses [Notre étude diffère de plusieurs manières importantes des données précédemment publiées sur les réponses immunitaires préexistantes à la grippe pandémique HN et l’effet de la vaccination contre la grippe porcine chez les personnes âgées . L’étude actuelle était prospective et mesuré les réponses d’anticorps chez les personnes, alors que la seule autre étude qui examinait les réponses au vaccin utilisait des échantillons de sérum stockés provenant d’études précédentes menées auparavant, principalement des études de vaccins antigrippaux le vaccin contre la grippe a donc été évalué immédiatement après la vaccination contre le virus, plutôt que maintenant, après & gt; Des années se sont écoulées Dans cette étude, Hancock et al ont trouvé que plus de% d’échantillons sériques de personnes nées dans les s ont montré des réponses neutralisantes de ⩾ à la grippe pandémique HN, et le vaccin «grippe porcine» a amplifié ces réponses. ⩾ Dans notre population, seulement% de la cohorte globale avait des titres de MN contre la grippe pandémique HN, et du sous-groupe qui a reçu le vaccin, seulement% a conservé les titres de MN ⩾ au présent Deux autres études ayant rapporté des titres de neutralisation de la grippe pandémique HN ont montré soit aucune réponse, soit une étude rétrospective des échantillons de sérum stockés en avril auprès des employés hospitaliers et des patients ou des réponses similaires à nos titres de prévaccination. Aucun n’a évalué l’impact du vaccin. Une différence majeure par rapport aux études précédentes semble être que notre population était fortement vaccinée; Dans l’ensemble, le% a reçu le vaccin saisonnier – et la plupart des membres de la cohorte ont été vaccinés chaque année en raison de leur statut de travailleurs de la santé Ainsi, les titres HAI contre la grippe saisonnière étaient très élevés par rapport aux autres données publiées [, ,], et les réponses croisées contre la grippe pandémique HN étaient similaires à celles contre la grippe saisonnière HN Hancock et al ont montré des titres géométriques moyens postvaccination très faibles par rapport au titre moyen géométrique de la grippe HN par HAI, -; % IC, – dans leurs cohortes de personnes âgées âgées de & gt; Greenberg et al ont observé des titres moyens géométriques basaux de prédaccination par rapport aux titres moyens géométriques de grippe HN de et par HAI dans les groupes vaccinaux; % ICs, – et -, respectivement dans leur cohorte d’adultes âgés – ans, et seulement% et% dans les groupes avaient prédit des réponses séroprotectrices Ainsi, leurs populations, qui ont été sélectionnées pour inclusion dans les essais vaccinaux et avaient des titres de base bas au virus influenza , sont probablement différents de notre population, qui sont systématiquement vaccinés chaque année et chez qui des titres moyens géométriques plus élevés et des réponses séroprotectrices plus fréquentes ont été identifiés. Cette étude comporte plusieurs limites importantes qui doivent être considérées pour mieux comprendre les données. C’est probablement en partie à cause de la conception de l’étude, qui était un échantillon de commodité des employés, et en partie à cause d’un biais de sélection probable, en ce sens que les personnes qui ont fait du bénévolat savaient que nous étudions les réponses au vaccin contre la grippe porcine et près de% de tous les participants avaient déjà reçu le vaccin. Nous n’avons pas tenté d’évaluer d’autres groupes qui pourraient être plus représentatifs de la population générale, car nous étions concentrés sur l’hypothèse centrale selon laquelle le vaccin améliorerait les réponses à la souche pandémique actuelle. Par conséquent, la généralisation de ces résultats à d’autres groupes devrait être prudente. Enfin, les essais en cours sont sujets à des variations entre les laboratoires, bien que nous ayons essayé de minimiser l’effet en utilisant les mêmes méthodes et définitions que celles utilisées dans l’étude précédemment rapportée En résumé, nous présentons les premières Nos résultats sont remarquables en ce que peu d’activité neutralisante a été observée dans notre cohorte hautement vaccinée d’adultes plus âgés malgré des titres élevés d’anticorps croisés par le test HAI. le vaccin, cependant, a renforcé ces réponses neutralisantes. Ces résultats suggèrent que l’immunité neutralisante Il est peu probable que la souche grippale HN pandémique soit responsable de la faible morbidité observée chez les personnes âgées au cours de la pandémie actuelle, et les résultats des essais vaccinaux ne rapportant que les données HAI doivent être interprétés avec prudence.

Remerciements

Nous remercions Amy Iverson pour son excellent support technique. Soutien financierNational Institute of Allergy and Infectious Diseases N-AI – CEIRS HN P à JAM et à l’ALSAC Conflits d’intérêts potentielsTous les auteurs: pas de conflits