Haute fréquence du test d’immuno-enzymatique lié au virus de l’hépatite C faussement positif à Rakai, en Ouganda

La prévalence de l’infection par le virus de l’hépatite C en Afrique subsaharienne reste incertaine Nous avons testé des individus de Rakai, Ouganda, avec la version Ortho Vaccin immuno-enzymatique HCV Tous les échantillons sérologiquement positifs ont été testés pour l’ARN du VHC Soixante-seize des participants étaient Anticorps anti-VHC positifs; aucun n’a été confirmé par la détection de l’ARN du VHC

virus de l’hépatite C, ELISA, AfricaLe virus de l’hépatite C chronique est une cause majeure de carcinome hépatocellulaire et de cirrhose Les estimations du fardeau de l’infection par le VHC en Afrique subsaharienne varient considérablement, mais la séroprévalence globale est estimée à <% -% dans les pays développés La compréhension du fardeau du VHC en Afrique subsaharienne revêt une importance particulière en raison de la prévalence élevée du virus de l'immunodéficience humaine et de l'augmentation du taux de complications dues à la co-infection par le VIH et le VHC. Les personnes infectées par le VIH en Afrique subsaharienne ont accès à un traitement antirétroviral hautement actif HAART entraînant une diminution des complications liées au SIDA, une hépatopathie associée au virus de l'hépatite B et au VHC pourrait devenir une cause de morbidité et de mortalité de plus en plus importante. La connaissance de la séroprévalence du VHC est essentielle pour le dépistage de l'approvisionnement sanguin En Afrique subsaharienne, la prévalence du VHC a En Ouganda, les estimations de séroprévalence du VHC varient de% à% , mais la variation observée peut refléter la performance des tests d'anticorps anti-VHC. Dans ce contexte Malgré une sensibilité et une spécificité élevées dans les populations américaines , les tests de dépistage des anticorps anti-VHC ont montré une erreur de classification faussement positive chez les populations africaines, suggérant que la séroprévalence peut être gonflée. ou le VIH, la malnutrition et diverses maladies chroniques ont été supposées augmenter la fausse positivité des tests d'anticorps anti-VHC, bien que ces associations restent spéculatives

MATÉRIAUX ET MÉTHODES

Nous rapportons des analyses effectuées sur des personnes infectées par le VIH et inscrites au programme de sciences de la santé de Rakai par âge, sexe et communauté pour les participants non infectés par le VIH de la Rakai Community Cohort Study. Fibroscan, Echosense, Paris, France pour quantifier de manière non invasive la fibrose hépatique Les méthodes de détermination du statut sérologique VIH et du nadir CD ont déjà été décrites Présence de VHB l’antigène de surface et les anticorps dirigés contre la schistosomiase ont été déterminés à l’aide d’un ELISA ETI-EKB s Plus ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay); Diasorin, Vercelli, Italie et ELISA IVD Research Inc antigène soluble, Inc, Carlsbad, Californie, respectivement Tous les participants ont fourni le consentement éclairé Approbation du conseil d’examen institutionnel pour cette étude a été reçue de l’Institut national des allergies et des maladies infectieuses, Johns Hopkins Les établissements médicaux, le Western Institutional Review Board d’Olympia, Washington, le Scientific and Ethics Committee de l’Uganda Virus Research Institute et le Uganda National Council for Science and TechnologySerum ont été testés manuellement en utilisant la version Ortho HCV ELISA Test System Ortho Clinical Diagnostics, Raritan Tous les échantillons ont été testés dans un seul puits, les échantillons initialement réactifs étant retestés en double avant leur interprétation finale. Tous les échantillons réactifs pour l’anticorps anti-VHC dans l’un ou l’autre des puits ont ensuite été considérés comme réactifs et classés comme positifs pour le VHC. cette analyse ARN viral de plusieurs fois réactif Les échantillons ont été extraits à l’aide d’un mini kit d’ARN viral QIAamp Qiagen, Valencia, Californie et quantifiés à l’aide d’un test Abbott RealTime HCV. Abbott Molecular Inc, Des Plaines, Illinois RT-PCR a été réalisée sur la région CORE / E le génome du VHC pour l’analyse qualitative des échantillons réactifs par le test HCV RealTime Pour déterminer si les échantillons étaient exempts d’inhibiteurs de l’amplification du VHC, nous avons effectué une seconde expérience où nous avons ajouté IU de particules virales du VHC AcroMetrix HCV Panel, AcroMetrix Corporation, Carlsbad, Californie en pré-extraction d’échantillons avec S / C fortement réactif & gt; Les analyses d’ELISA du VHC ont été réalisées chez des sujets infectés par un test ELISA positif pour le VHC. Les ananyses ont examiné les associations d’ELISA VHC-positifs avec des facteurs de risque de VHC ou de maladie hépatique, y compris l’âge, le sexe, la consommation actuelle d’alcool, Consommation d’alcool ≥ L / semaine, pêche professionnelle à vie et utilisation actuelle des plantes et paramètres cliniques incluant l’antigène de surface du VHB, l’anticorps Schistosoma et la rigidité hépatique mesurés par élastographie transitoire. Une régression logistique univariée et multivariée a été utilisée pour estimer les intervalles de confiance de la positivité au test ELISA du VHC Une analyse de régression logistique multivariée a été effectuée, y compris l’âge, le sexe et les covariables avec une valeur P de & lt; en analyses univariées Toutes les analyses statistiques ont été réalisées à l’aide du logiciel Stata, version

RÉSULTATS

Parmi les échantillons infectés par le VIH et non infectés par le VIH testés,% ont été classés en tant que valeur médiane positive du signal ELISA du VHC au seuil =; intervalle interquartile [IQR], – Aucun des participants n’avait d’antécédents de traitement pour l’infection par le VHC Deux des échantillons positifs pour le VHC ELISA étaient réactifs pour l’ARN du VHC en utilisant le test Abbott RealTime HCV, mais présentaient de faibles niveaux & lt; IU / mL Ces échantillons n’étaient pas positifs par RT-PCR nichée interne hautement sensible. En outre, tous les échantillons enrichis d’une quantité connue de VHC ont amplifié la charge virale correcte, démontrant qu’il n’y avait pas d’inhibition de l’amplification virale dans les échantillons. -les sujets positifs non sous HAART avaient des charges de VIH comparables à la charge virale médiane des données historiques, des copies de journaux / mL; IQR, -En analyse univariée, la séropositivité au VHC n’était pas associée à la fibrose hépatique. L’âge, le sexe, le statut sérologique et la consommation actuelle d’herbes ou d’alcool n’étaient pas significativement associés à la séropositivité au VHC. ELISA P = Aucune personne ayant un test ELISA faussement positif au VHC n’a été classée comme ayant une infection chronique au VHB VHB antigène positif, étant un pêcheur professionnel à vie, ou consommant beaucoup de boissons alcoolisées ≥ L / semaine En analyse multivariée, les individus infectés par le VIH ont significativement moins susceptibles d’avoir un résultat ELISA positif pour le VHC P =, alors que les sujets avec un test ELISA positif pour le schistosoma étaient plus susceptibles d’être séropositifs pour le VHC P = des échantillons avec un test ELISA positif pour le VHC, les échantillons étaient positifs pour l’anticorps Schistosoma

Facteurs de tableau associés au virus de l’hépatite C positif Facteur de dosage de l’immunosorbant lié à l’enzyme% ELISA du VHC Positif Non OU% CI P Valeur Ajustée OU% CI P Valeur Âge, y & lt; / – / – – / – – – / – – – / – – ≥ / – – Sexe Féminin / Masculin / – – Statut VIH Négatif / Positif / – – Schistosoma Ab Négatif / Positif / – – Rigidité hépatique & lt; kPa / … – kPa / – … … ≥ kPa / – … … Utilisation actuelle des herbes Non / … Oui / – … … Consommation d’alcool actuelle Non / … Oui / – … … Facteur% VHC ELISA Positif Non OU% CI P Valeur ajustée OU % CI P Valeur Âge, y & lt; / – / – – / – – – / – – – / – – ≥ / – – Sexe Féminin / Masculin / – – Statut VIH Négatif / Positif / – – Schistosoma Ab Négatif / Positif / – – Rigidité hépatique & lt; kPa / … – kPa / – … … ≥ kPa / – … … Utilisation actuelle des herbes Non / … Oui / – … … Consommation d’alcool actuelle Non / … Oui / – … … Abréviations: Ab, anticorps, IC, intervalle de confiance; ELISA, dosage immuno-enzymatique; VHC, virus de l’hépatite C; VIH, virus de l’immunodéficience humaine; kPa, kilopascal; OU, odds ratio

CONCLUSIONS

L’absence d’une virémie détectable suggère fortement une faible prévalence de l’infection chronique par le VHC Comme environ un% des infections par le VHC résolvent spontanément et éliminent le VHC ARN mais pas d’anticorps, il est possible que certains des échantillons positifs pour le virus ELISA positifs, négatifs à l’ARN du VHC, reflètent des infections à VHC. Cependant, l’absence de tout échantillon positif à l’ARN indique que la majorité représente des tests faussement positifs anti-inflammatoire non stéroïdien. Comme toutes les plaques Ortho ELISA répondaient aux critères d’acceptation du contrôle qualité du fabricant et que les contrôles RT-PCR étaient également valides, il est peu probable que les résultats observés soient le résultat d’un kit défectueux. Aucun inhibiteur n’était présent dans les échantillons hautement réactifs par immunodosage enzymatique du VHC. Ces résultats sont étonnamment similaires à ceux d’un essai récent. étude du Malawi, où aucun des échantillons sérologiquement réactifs pour le VHC utilisant l’immunodosage chimioluminescent Ortho Vitros anti-VHC n’était positif à l’ARN du VHC avec une version du test Cobas Amplicor HCV Nous avons trouvé une forte association entre un résultat positif au test ELISA du VHC et un test ELISA de Schistosoma positif, qui peut refléter une réaction croisée de marqueurs auto-immuns associés à une infection à Schistosoma mansoni Plus important encore, nos données ne démontrent aucune association de séroréactivité du VHC avec le degré de fibrose hépatique mesurée par élastographie transitoire. La séroréactivité du VHC associée à la rareté de l’ARN du VHC détectable suggère que le dépistage du sang dans cette population avec un test ELISA peut entraîner l’élimination inappropriée d’une proportion importante de produits sanguins. La fréquence élevée de classification erronée observée avec le test ELISA Ortho suggère une prévalence estimations basées sur les résultats ELISA alo peut être gonflé dans des populations africaines subsahariennes similaires; confirmation avec un test d’acide nucléique devrait être souligné

Remarques

Remerciements Les auteurs reconnaissent les contributions des participants et des membres du Programme des sciences de la santé de Rakai. Soutien financier Ce travail a été soutenu par la Division de la recherche intra-muros, Institut national des allergies et des maladies infectieuses NIAID, National Institutes of Health NIH. Réseau d’essais de prévention du VIH parrainé par le NIAID, l’Institut national Eunice Kennedy Shriver de la santé infantile et du développement humain, l’Institut national sur la toxicomanie, l’Institut national de santé mentale et le Bureau de la recherche sur le sida du ministère de la Santé. et Services Humains UM-AI et R DA Auteur contributions Conçu et conçu les expériences: CEM, OL, LS Collecte de données organisée: SJR, PO, IB, LS Réalisé les expériences: CEM, OL, JQ, LS Analysé les données: CEM, OL, LS Réactifs apportés / matériaux / outils d’analyse: SJR, PO, GRH, GDK, DLT, TCQ Rédaction de l’article: CEM, OL, SJR, PO, JQ, IB, RHG, GDK, DLT, TCQ, L SDisclaimer Les conclusions et les conclusions de cet article sont celles des auteurs et ne représentent pas nécessairement les vues du NIH, du Département d’Etat américain ou de l’Université Johns Hopkins. d’intérêt Tous les auteurs: Aucun conflit signalé Tous les auteurs ont soumis le formulaire ICMJE pour la divulgation des conflits d’intérêts potentiels Conflits que les éditeurs considèrent pertinents pour le contenu du manuscrit ont été divulgués