Essai randomisé comparant la vaccine sur les surfaces externes des bandages conventionnels appliqués aux sites de vaccination antivariolique chez les primo-vaccinés

Antécédents Préoccupation concernant la transmission accidentelle après la vaccination antivariolique: diverses recommandations concernant la couverture du site de vaccination. Méthodes Quelques jours après la première vaccination antivariolique, les sujets adultes ont été randomisés pour appliquer un bandage auto-adhésif n =, une gaze avec du ruban adhésif n =, ou gaze avec un pansement semi-perméable n = sur le site de vaccination pour une moyenne de ± h Les prélèvements provenant des surfaces de pansement externes et les sites de vaccination ont ensuite été évalués par PCR en temps réel PCR en mode aveugleRésultats Parmi les sujets complétant l’étude, PCR Les résultats étaient positifs pour le site de vaccination en% et sur les écouvillons pour les surfaces externes des bandages faits. Il n’y avait pas de différence entre les bandages P = Conclusions Au lendemain de la vaccination contre la variole, un pansement auto-adhésif était aussi efficace que plus volumineux. , bandages moins pratiques pour limiter le virus détectable par PCR sur la surface externe

Les préoccupations récentes au sujet du terrorisme biologique ont incité les États-Unis à instituer un programme d’immunisation contre la variole, en commençant par les soldats, les travailleurs de la santé et les premiers intervenants étant donné que & gt; Des millions d’Américains n’ont jamais été vaccinés avec la vaccine , une préoccupation majeure parmi cette première vague de receveurs, dont beaucoup sont naïfs de la vaccine, est le transfert accidentel de virus pendant la postvaccination vers des membres naïfs de la famille, des contacts familiaux ou des patients. risque plus élevé de réactions graves, telles que les personnes atopiques ou immunodéprimées Les individus naïfs de vaccine libèrent la vaccine plus longtemps et à des titres plus élevés que les sujets vaccinés, augmentant potentiellement le risque de transfert viral accidentel Depuis le début En décembre, des cas de transmission accidentelle de contacts ont été signalés Les recommandations pour couvrir le site de vaccination varient L’Organisation mondiale de la santé L’OMS ne préconise pas le bandage Les Centres américains de contrôle et de prévention des maladies recommandent le CDC une pansement de gaze poreuse dans un environnement autre que médical ou une pansement de gaze recouvert d’une semoule membrane membranaire pour les agents de santé On ne sait pas si le type de bandage appliqué sur un site de vaccination affecte le passage viral vers la surface externe Dans cette étude, quelques jours après la vaccination des soldats naïfs, nous avons appliqué des bandages conventionnels aux sites de vaccination. Après une période d’activité quotidienne, nous avons obtenu des prélèvements sur les surfaces de pansement externes et les réactions au site de vaccination pour analyse par PCR et culture spécifiques à la vaccine en temps réel.

Patients et méthodes

o la peau du bras supérieur Dryvax; Wyeth Laboratories; Le jour de la randomisation du bandage, tous les sites de vaccination ont été évalués par un investigateur expérimenté pour une réaction majeure ou «prise», signe souhaitable du succès du vaccin défini par l’OMS comme pustule, escarre ou ulcère entouré par une zone d’inflammation ou de congestion Les sujets sans réaction majeure ont été exclus de la poursuite de la participation. Six ou plusieurs jours après la vaccination, les participants avec une réaction majeure ont été randomisés pour recevoir des pansements, appliqués par un seul investigateur. réaction, y compris la pustule et l’érythème environnant, ont été calculés par la moyenne des diamètres orthogonaux Groupe a reçu un pansement auto-adhésif bandage × -cm; Johnson & amp; Johnson; groupe a reçu plié × -cm gaze Kendall Clarity Gaze Éponge couverte par un morceau × -cm de bande adhérente Ruban chirurgical Transpore; M; et le groupe a reçu la gaze de gaze de clarté Kendall non pliée × -cm éponge recouverte d’une membrane semi-perméable × -cm Pansement transparent Polyskin II; Kendall Après l’application du pansement, les participants ont repris leurs activités quotidiennes, mais on leur a demandé de ne pas se baigner ou de retirer le pansement. Après ± h, un seul applicateur à tige rayonne stérile et roulé à sec; Harwood Produit sur la surface externe du bandage avec une pression uniforme, comme décrit ailleurs Le bandage a été enlevé et un deuxième tampon sec a été roulé sur la pustule de réaction de manière similaire Chaque tampon a été placé dans un flacon stérile contenant du milieu de transport viral ; Viromed Laboratories Des aliquots de matériel contenant du tampon VTM ont été stockés à ° C pendant des semaines jusqu’à ce que la PCR soit effectuée et le reste du VTM a été conservé à – ° C pendant un mois jusqu’à ce que la culture soit faite. de rien à sévère pour décrire le degré d’inconfort de bandage, et ils ont évalué la douleur musculaire, articulaire et thoracique, la céphalée, et le site de vaccination prurit sur une échelle à la plus sévère RCP et les cultures virales Un seul investigateur aveugle à l’origine de l’échantillon PCR Cepheid a été réalisé selon le protocole LRN du réseau de réponse de laboratoire de l’institution au moyen de réactifs et de procédures similaires à ceux développés au CDC Richard F Meyer, Inger Damon , et Yu Li Le protocole LRN a été développé dans le cadre d’un algorithme visant à exclure l’activité terroriste biologique et à évaluer les réactions indésirables liées au vaccin antivariolique ions Nous avons effectué des extractions d’ADN QIAmp DNA Mini Kit; La séquence d’amorces de la vaccine est une information exclusive Un programme de cyclage thermique rapide a été fourni, et la fluorescence a été mesurée à la fin de chaque étape de recuit. Les échantillons ont été considérés comme positifs pour la vaccine si la courbe de fluorescence une ligne de fluorescence prédéterminée dans le temps de cycle allouéAprès l’analyse PCR, tous les échantillons de surface de bandage ayant des résultats PCR positifs ont été appariés avec des écouvillons de surface PCR-négatifs du même groupe choisis au hasard et cultivés dans des cellules de carcinome pulmonaire humain A. Viromed Laboratories Des cultures positives et un contrôle positif à Dryvax contenant ~ unités logarithmiques pfu / mL ont également été cultivées. Les cultures ont été maintenues à ° C et observées quotidiennement par un technicien expérimenté aveugle à l’origine de l’échantillon pour l’effet cytopathique CPE pendant plusieurs jours, classées de% à% Nous avons quantifié le log pfu / mL pour les écouvillons en effectuant une régression logarithmique analyse des valeurs de TC du cycle de seuil de PCR en temps réel des aliquotes dupliquées en μl diluées en série du lot de Dryvax contenant ~ x pfu / mL Une ligne de meilleure adaptation R = avec une gamme de – log pfu / mL a été établieAnalyse statistique Sur la base des études décrivant les types de bandages chez un nombre limité de sujets vaccinés , nous avons émis l’hypothèse que la proportion de bandages avec la vaccine détectable par PCR dans les groupes, et serait respectivement%,% et% Pour limiter le risque d’erreur de type I En raison de l’incertitude dans les proportions des hypothèses, une analyse intérimaire par protocole a été effectuée après les inscriptions pour réévaluer l’hypothèse. Plus d’inscriptions pour atteindre l’échantillon cible Pour les «prises», nous avons estimé que% aurait des résultats de PCR positifs. Le point final principal, la détection par PCR de l’ADN de la vaccine. Les résultats de culture ont été exprimés en proportions. Les mesures du site de vaccination et la satisfaction des patients pour chaque pansement ont été comparées à l’analyse de la variance, et les scores de symptômes mesurés ont été analysés par Kruskal-Wallis. les valeurs de test P de ⩽ ont été considérées significatives

Résultats

Les sujets complétant l’étude par protocole étaient similaires en âge âge moyen, années, sexe% étaient des hommes, race% étaient blancs, nombre de jours depuis la vaccination signifie, et taille de la réaction majeure parmi les groupes randomisés Un sujet n’a pas réussi à développer réaction et a été exclu avant la randomisation bandage, et les sujets ont échoué à retourner après l’application de bandage en groupe, en groupe, et dans le groupe un sujet du groupe a reçu le bandage jours après la vaccination et a été inclus dans l’analyse. Les temps d’application des pansements étaient similaires pour chaque groupe, mais le groupe présentait un inconfort de pansement significativement moindre. P = Autres scores de symptômes, y compris les douleurs musculaires P =, douleurs articulaires P =, douleurs thoraciques P =, Les prurits localisés P = et les céphalées P = n’étaient pas significativement différents entre les groupes. Dix% des prélèvements de pansement ont donné des résultats de PCR positifs. , avec le moins d’entre eux étant dans le groupe P = La plupart des écouvillons de réaction principaux étaient positifs pour la PCR [%] Les écouvillons de réaction majeurs négatifs à la PCR avaient également des écouvillons de surface de bandage négatifs à la PCR

Tableau View largeTélécharger les résultats cliniques, subjectifs et de laboratoire des sujets vaccinés contre la varioleTable View largeTélécharger les diapositivesRésultats cliniques, subjectifs et de laboratoire des sujets vaccinés contre la varioleLe sujet du groupe qui a appliqué le bandage quelques jours après la vaccination avait un test de bandage positif et était le seul participant qui avait plus d’ADN de la vaccine sur la surface du bandage que le log de réaction principal pfu / mL vs log pfu / mL, respectivement. Pour les autres échantillons de bandage PCR-positif, la quantité de pfu / mL de la vaccine était moins avec les écouvillons de réaction majeurs correspondants, quel que soit le type de bandage P = Deux des échantillons de bandage PCR-positifs un du groupe et l’autre du groupe développé CPE table Les deux échantillons ont montré CPE par jour, atteignant respectivement le% et le% de cellules. les échantillons présentaient les valeurs les plus élevées du log pfu / mL et du logithium pfu / mL les plus faibles, respectivement, dans la bande positive pour la PCR écouvillonnages Tous les écouvillons de pustules de la vaccine positifs sélectionnés au hasard et l’échantillon de contrôle Dryvax ont développé un ECP de h, progressant à% par jour, alors que tous les écouvillons de surface à bandage négatif sélectionnés au hasard ne montraient aucun ECP de jour

Discussion

Nos résultats suggèrent qu’un pansement adhésif simple peut être aussi efficace que d’autres pansements de gaze ou de gaze semi-perméables moins encombrants et moins pratiques pour limiter le passage viral d’une vaccination antivariolique à la surface externe du pansement pendant une période d’activité routinière. était notable parce que nos mesures ont été obtenues – jours après la vaccination, coïncidant avec le milieu de la période de pointe pour l’excrétion postvaccinale de la vaccine et un temps optimal pour évaluer une “prise” [,,] Nos sujets étaient naïfs de la vaccine. Parmi les surfaces de pansement avec une vaccine détectable par PCR, seules les cultures étaient positives, suggérant que les particules virales atteignant la surface du pansement externe peuvent avoir une viabilité limitée et, peut-être, un potentiel limité de transmission accidentelle Néanmoins, la technique d’écouvillonnage, le traitement des échantillons, la congélation-décongélation, les facteurs de la cellule hôte et les conditions de culture peuvent avoir Les recommandations du CDC pour le bandage des sites de vaccination sont largement modélisées après des études descriptives , mais nous ne connaissons pas d’études comparatives prospectives évaluant ces options In, Graham et al ont trouvé que% de membranes semi-perméables couvrant le le site était culture positive, un chiffre réduit à% lorsque la gaze était couverte de membranes semi-perméables Cooney et al , dans un groupe de patients, décrivait un% de surface de culture de la vaccine après application d’une gaze × -cm recouverte d’un × -cm Membrane semi-perméable Plus récemment, Talbot et al ont rapporté une faible incidence de la vaccine sur la surface du bandage, mais les sites de vaccination étaient couverts de pansements occlusifs imperméables, une option relativement peu pratique Ici, un bandage auto-adhésif limite efficacement la PCR et la culture -détectable virus sur la surface du pansement externe après une période d’activité de routine, ce qui suggère une option simple mais raisonnablement efficace pour le vaccin de routine soins in-site L’utilisation d’un bandage auto-adhésif s’aligne également sur les recommandations pour éviter plus de bandages occlusifs pouvant causer une macération ou une infection bactérienne Néanmoins, et en accord général avec notre hypothèse, le groupe de bandages gazeux semi-perméable a le plus petit C’est la première étude à utiliser la PCR en temps réel pour détecter la vaccine sur la surface du pansement. La technique a bien fonctionné, avec des résultats d’échantillons témoins positifs et négatifs reproductibles, ainsi qu’un taux de détection positif de ~% pour les écouvillons «Prend», un taux généralement compatible avec les stratégies actuelles de PCR orthopoxvirus La PCR en temps réel a permis la construction d’un graphique logarithmique pour estimer la quantité d’ADN de la vaccine pour chaque écouvillon sur la base du temps de cycle de la PCR. Quelques études Nous avons mesuré l ‘ADN viral une fois sur les surfaces des bandages après ~ h. En pratique, cependant, on pourrait demander aux receveurs de changer leur pansement tous les jours. Trois semaines de changements de pansements compliquent la mise en conformité, surtout si un pansement moins volumineux et moins pratique est utilisé. Cela souligne l’idée qu’un simple adhésif de plâtre contenant un matériau absorbant pourrait augmenter la conformité, et peut-être même réduire le risque de transmission accidentelle Des stratégies pour mieux définir l’efficacité de ces pansements et d’autres bandages pour limiter le passage du virus à la surface externe du pansement comprennent l’application pendant plusieurs jours, les habitudes de bain normales et les échantillonnages multiples

Remerciements

Nous remercions Margaret Tuchscherer d’avoir dirigé les cultures viralesConflit d’intérêt Tous les auteurs: Pas de conflit